ELISA試劑盒審查內(nèi)容包括:
1. 試劑盒的名稱(chēng):ELISA試劑盒名稱(chēng)一般由“(物種)+(測(cè)定指標(biāo))+酶聯(lián)免疫試劑盒(ELISA)”,物種和測(cè)定指標(biāo)不能搞錯(cuò),否則買(mǎi)錯(cuò)了就是你的事情;另外有的試劑盒說(shuō)明書(shū)試劑盒名稱(chēng)明顯與寫(xiě)在試劑盒上的名稱(chēng)不符,這要引起你的警惕。
2. 用途:應(yīng)用于科研還是臨床診斷,用于臨床診斷的有衛(wèi)生部的批準(zhǔn)文號(hào)。
3. 測(cè)定原理:現(xiàn)在ELISA試劑盒除非是測(cè)定抗體的以外,一般使用的是雙抗體夾心法,此種方法大多數(shù)用的是增強(qiáng)的雙抗體夾心法,即使用*-親和素系統(tǒng),還有少數(shù)的指標(biāo)可能使用競(jìng)爭(zhēng)法,這類(lèi)方法適用于半抗原的測(cè)定。具有復(fù)雜結(jié)構(gòu)的多表位蛋白抗原,其雙抗體夾心法中的一個(gè)抗體必須用單抗,否則背景很高。當(dāng)然如果兩個(gè)都是單抗(這兩個(gè)單抗針對(duì)不同表位),那么測(cè)定的線性范圍就較寬,試劑盒性能就較好;一個(gè)用單抗,一個(gè)用多抗,測(cè)定的靈敏度會(huì)較高。某些簡(jiǎn)單的化合物用ELISA試劑盒ELISA測(cè)定時(shí),因?yàn)闆](méi)有兩個(gè)或以上的表位,一般只能作為半抗原,只能用競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定。如果你發(fā)現(xiàn)有測(cè)定簡(jiǎn)單化合物(如雌激素、NO、地高辛等)用雙抗體夾心法作測(cè)定原理時(shí),這個(gè)試劑盒你就要懷疑了。另外還要說(shuō)明一步雙抗體夾心法與兩步雙抗體夾心法的區(qū)別。
一步雙抗體夾心法的吸光度-劑量曲線呈鐘形,隨著待則標(biāo)本中抗原濃度的增加而升高至一定程度后,測(cè)定吸光度即隨抗原濃度的增加而開(kāi)始下降直至不顯色,即所謂的“鉤狀效應(yīng)”(hook eHect),也就是我們?cè)诿庖叱恋碓囼?yàn)中所稱(chēng)的“帶現(xiàn)象”(zone phenomenon)。所以當(dāng)使用一步雙抗體夾心法時(shí),樣品濃度太高,有時(shí)會(huì)出現(xiàn)測(cè)不出來(lái)的現(xiàn)象,此時(shí)要作適當(dāng)?shù)南♂尣拍軠?zhǔn)確測(cè)定。
4. 試劑盒的組成:用雙抗體夾心法作為測(cè)定的方法時(shí),試劑盒的組成一般包括:
已包被單抗的酶標(biāo)板:一塊,有96孔的,也有48孔的,可拆缷,外面有鋁箔袋密封,打開(kāi)后有干燥劑,實(shí)驗(yàn)時(shí)暫未使用的酶標(biāo)條要連帶干燥劑密封好,放在4℃冰箱中妥善保存。
以上是ELISA試劑盒的審查內(nèi)容,大家以后在購(gòu)買(mǎi)時(shí)可以依照以上幾點(diǎn)進(jìn)行選購(gòu)!