色譜裝柱機應用及工作原理

時間：2016/10/31閱讀：271

色譜裝柱機應用及工作原理

以填裝5um 硅膠 4.6×250 分析柱為例
連接裝柱所需空壓機和色譜裝柱機，確保裝柱機工作時機身穩(wěn)固；
稱取填料3.0-3.5g （4.6×250 分析柱標準需要2.8g，經(jīng)驗3.2g比較合適）；
用40-50ml異丙醇（或異丙醇與乙腈比例1：1）溶解填料，用玻璃棒攪拌均勻后用超聲波超3分鐘，以確保其分散性；
迅速將上述混合液倒入勻漿罐（盡量短時間內(nèi)完成該工序并確保勻漿罐內(nèi)無氣泡），如勻漿罐不滿再用異丙醇（或異丙醇與乙腈比例1：1）補滿，理想情況是不需要再補充異丙醇（或異丙醇與乙腈比例1：1），熟練后可知需要多少原料，所需原料的梁與溫度、填料溶解性有關；
迅速將勻漿罐和柱子連接到泵上以60MPA的壓力，以甲醇（化學純）做流動相開啟裝柱機，保持裝柱機在60MPa壓力下工作20分鐘；
減壓至30MPa運行5-10分鐘，緩慢降壓至系統(tǒng)無壓力靜止3分鐘；
卸下柱子看柱頭部分是否平整，如不平整用美工刀鏟平（很需要技術的步驟）；
將柱子接入液相色譜儀，用甲醇（色譜級）以1.0流速運行30分鐘；
開始檢驗色譜柱效；
多次熟練此工作，以提高裝柱質(zhì)量。

備注：異丙醇（或異丙醇與乙腈比例1：1）至少分析純；
甲醇為控制成本可用化學純，但事先需要經(jīng)過0.2um有機濾膜過濾；
工作開始前開啟裝柱機用流動相甲醇沖洗管路，盡量確保管路中無氣泡。

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