用HPLC進(jìn)行分析時(shí)保留時(shí)間有時(shí)發(fā)生漂移,有時(shí)發(fā)生快速變化,原因何在?如何解決?
關(guān)于漂移問題:
①溫度控制不好,解決方法是采用恒溫裝置,保持柱溫恒定
②流動(dòng)相發(fā)生變化,解決辦法是防止流動(dòng)相發(fā)生蒸發(fā)、反應(yīng)等
?、壑游雌胶夂?,需對(duì)柱子進(jìn)行更長(zhǎng)時(shí)間的平衡
關(guān)于快速變化問題
①流速發(fā)生變化,解決辦法是重新設(shè)定流速,使之保持穩(wěn)定
?、诒弥杏袣馀荩赏ㄟ^排氣等操作將氣泡趕出。
?、哿鲃?dòng)相不合適,解決辦法為改換流動(dòng)相或使流動(dòng)相在控制室內(nèi)進(jìn)行適當(dāng)混合
2.液相色譜中峰出現(xiàn)拖尾或出現(xiàn)雙峰的原因是什么?
?、俸Y板堵塞或柱失效,解決辦法是反向沖洗柱子,替換篩板或更換柱子。
?、诖嬖诟蓴_峰,解決辦法為使用較長(zhǎng)的柱子,改換流動(dòng)相或更換選擇性好的柱子
③可能柱超載,減少進(jìn)樣量。
3.HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法
?、贅悠妨坎蛔悖鉀Q辦法為增加樣品量
?、跇悠肺磸闹又辛鞒?。可根據(jù)樣品的化學(xué)性質(zhì)改變流動(dòng)相或柱子
?、蹣悠放c檢測(cè)器不匹配。根據(jù)樣品化學(xué)性質(zhì)調(diào)整波長(zhǎng)或改換檢測(cè)器
?、軝z測(cè)器衰減太多。調(diào)整衰減即可。
?、輽z測(cè)器時(shí)間常數(shù)太大。解決辦法為降低時(shí)間參數(shù)
?、迿z測(cè)器池窗污染。解決辦法為清洗池窗。
?、邫z測(cè)池中有氣泡。解決辦法為排氣。
⑧記錄儀測(cè)壓范圍不當(dāng)。調(diào)整電壓范圍即可。
?、崃鲃?dòng)相流量不合適。調(diào)整流速即可。
?、鈾z測(cè)器與記錄儀超出校正曲線。解決辦法為檢查記錄儀與檢測(cè)器,重作校正曲線。
4.做HPLC分析時(shí),柱壓不穩(wěn)定,原因何在?如何解決?
?、俦脙?nèi)有空氣,解決的辦法是清除泵內(nèi)空氣,對(duì)溶劑進(jìn)行脫氣處理;
?、诒壤y失效,更換比例閥即可;
?、郾妹芊鈮|損壞,更換密封墊即可;
④溶劑中的氣泡,解決的辦法是對(duì)溶劑脫氣,必要時(shí)改變脫氣方法;
?、菹到y(tǒng)檢漏,找出漏點(diǎn),密封即可;
?、尢荻认疵摚@時(shí)壓力波動(dòng)是正常的。