用HPLC進行分析時保留時間有時發(fā)生漂移,有時發(fā)生快速變化,原因何在?如何解決?
關于漂移問題:
?、贉囟瓤刂撇缓?,解決方法是采用恒溫裝置,保持柱溫恒定
?、诹鲃酉喟l(fā)生變化,解決辦法是防止流動相發(fā)生蒸發(fā)、反應等
③柱子未平衡好,需對柱子進行更長時間的平衡
關于快速變化問題
?、倭魉侔l(fā)生變化,解決辦法是重新設定流速,使之保持穩(wěn)定
②泵中有氣泡,可通過排氣等操作將氣泡趕出。
③流動相不合適,解決辦法為改換流動相或使流動相在控制室內進行適當混合
2.液相色譜中峰出現(xiàn)拖尾或出現(xiàn)雙峰的原因是什么?
①篩板堵塞或柱失效,解決辦法是反向沖洗柱子,替換篩板或更換柱子。
?、诖嬖诟蓴_峰,解決辦法為使用較長的柱子,改換流動相或更換選擇性好的柱子
?、劭赡苤d,減少進樣量。
3.HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法
?、贅悠妨坎蛔?,解決辦法為增加樣品量
?、跇悠肺磸闹又辛鞒觥?筛鶕悠返幕瘜W性質改變流動相或柱子
?、蹣悠放c檢測器不匹配。根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器
?、軝z測器衰減太多。調整衰減即可。
?、輽z測器時間常數(shù)太大。解決辦法為降低時間參數(shù)
?、迿z測器池窗污染。解決辦法為清洗池窗。
?、邫z測池中有氣泡。解決辦法為排氣。
?、嘤涗泝x測壓范圍不當。調整電壓范圍即可。
?、崃鲃酉嗔髁坎缓线m。調整流速即可。
⑩檢測器與記錄儀超出校正曲線。解決辦法為檢查記錄儀與檢測器,重作校正曲線。
4.做HPLC分析時,柱壓不穩(wěn)定,原因何在?如何解決?
①泵內有空氣,解決的辦法是清除泵內空氣,對溶劑進行脫氣處理;
?、诒壤y失效,更換比例閥即可;
③泵密封墊損壞,更換密封墊即可;
?、苋軇┲械臍馀?,解決的辦法是對溶劑脫氣,必要時改變脫氣方法;
?、菹到y(tǒng)檢漏,找出漏點,密封即可;
⑥梯度洗脫,這時壓力波動是正常的。