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肌醇又稱環(huán)己六醇,是維生素類藥物及降血脂藥,可促進(jìn)肝及其他組織中的脂肪代謝,用于脂肪肝、高血脂癥的輔助治療。由于肌醇分子中缺乏合適的生色團(tuán)和電活性基團(tuán),難以直接用通常的分析方法來(lái)進(jìn)行測(cè)定。
在國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中肌醇含量測(cè)定方法有重量法、微生物法和高*氧化法,亦有HPLC法和GC法。微生物法和重量法操作繁瑣、費(fèi)時(shí),重量法測(cè)定肌醇及其制劑的含量時(shí),還存在用樣量大、且有損健康;高*氧化法則要嚴(yán)格控制加熱氧化的時(shí)間一致,否則測(cè)定結(jié)果將會(huì)有很大的誤差;而HPLC法,采用末端吸收進(jìn)行檢測(cè),誤差較大。魯創(chuàng)儀器采用將肌醇硅烷化處理,正己烷提取后,以程序升溫氣相色譜儀測(cè)定肌醇的含量,方法簡(jiǎn)單,結(jié)果準(zhǔn)確。
氣相色譜法測(cè)定所需儀器與試劑
儀器:氣相色譜儀GC-9860配置FID檢測(cè)器,色譜柱,工作站,氣源,數(shù)控超聲清洗器,25ml具塞試管。
試劑:正己烷、*、二甲基甲酰胺均為分析純(二甲基甲酰胺用前需減壓蒸餾除去水分);*基氯硅烷,六甲基二硅胺烷,肌醇對(duì)照品、肌醇樣品。
氣相色譜儀測(cè)定肌醇含量時(shí)需注意的幾個(gè)方面
1)由于肌醇分子中缺乏合適的生色團(tuán)和電活性基團(tuán),難以直接用通常的分析方法測(cè)定??紤]到肌醇環(huán)狀飽和多羥基的結(jié)構(gòu)特征,選擇將其進(jìn)行硅烷化處理,以正己烷提取后進(jìn)行氣相色譜分析。分別選用幾種硅烷化試劑,以及不同比例進(jìn)行測(cè)試比較,確定選用二甲基氯硅烷與六甲基二硅胺烷以1∶3混合作為衍生化試劑,效果較佳。
2)因肌醇硅烷化后氣化溫度較高,進(jìn)樣室溫度選擇為260℃;試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),肌醇硅烷化處理后有較多的雜峰,柱溫采用恒溫操作時(shí),若柱溫太高,溶劑峰未回至基線,主峰就已出柱,且將雜峰包在其中;若柱溫太低,則分析流程長(zhǎng),且峰形嚴(yán)重拖尾;而選擇程序升溫操作,不僅可使雜峰與主峰達(dá)到較好分離,且峰形較好,保留時(shí)間適當(dāng)。
3)填充柱采用程序升溫,基線漂移較為嚴(yán)重,試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),選擇兩根相同型號(hào)的色譜柱,以雙通道同時(shí)通載氣可起到平衡作用,減小基線漂移,以便較好測(cè)定。
4)為使硅烷化反應(yīng)*,所用二甲基甲酰胺應(yīng)*行減壓蒸餾除水后使用。硅烷化反應(yīng)速度較慢,應(yīng)在水浴適當(dāng)加熱,以加快硅烷化反應(yīng)速度。
山東魯創(chuàng)分析儀器有限公司一直致力于氣相色譜儀研發(fā)與生產(chǎn),并為客戶制定詳細(xì)的產(chǎn)品分析方案,如有肌醇相關(guān)的分析儀器需求請(qǐng)直接與公司技術(shù)人員,亦可登錄魯創(chuàng)分析在線咨詢,歡迎考察合作!
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