新城疫傳統(tǒng)的診斷方法主要依賴于病毒的分離和鑒定。但由于疫苗的廣泛應(yīng)用，從現(xiàn)場(chǎng)分離到新城疫病毒或用各種方法檢測(cè)到新城疫病毒也不能肯定雞群發(fā)生的就是新城疫，因?yàn)榉蛛x到的新城疫病毒有可能是疫苗毒。要確定新城疫病毒毒株或分離物是哪一個(gè)毒力型，還必須進(jìn)行系統(tǒng)的生物學(xué)試驗(yàn)，測(cè)定毒力指數(shù)（MDT、ICPI、IVPl）。但這些試驗(yàn)費(fèi)時(shí)、費(fèi)力、費(fèi)錢，不適宜于臨床診斷應(yīng)用。新城疫病毒分子結(jié)構(gòu)和致病性關(guān)系研究的日益深入為新城疫特異性診斷技術(shù)，特別是從病原體角度建立株特異性鑒定技術(shù)的研究奠定了理論基礎(chǔ)，根據(jù)不同致病性新城疫病毒株存在的分子結(jié)構(gòu)差異（核苷酸序列差異和氨基酸序列差異）使得應(yīng)用單克隆抗體技術(shù)、核酸探針技術(shù)和PCR技術(shù)建立各種特異、快速的新城疫診斷方法成為可能。

核酸探針技術(shù)是在已獲得的病毒特異片段上標(biāo)記放射性同位素或*作為探針而建立的一種分子雜交診斷方法，具有簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、靈敏等顯著優(yōu)點(diǎn)。

1992年Jacecki-Black等利用特異性針對(duì)中發(fā)型和緩發(fā)型分離株的連接肽特性，設(shè)計(jì)了一個(gè)寡核苷酸，并用這個(gè)寡核苷酸作為探針進(jìn)行狹縫印跡雜交，試驗(yàn)證明該探針至少可檢出o．25一o．5／Lg的NDVRNA，病毒感染組織樣品和雞胚增殖均可用該辦法檢測(cè)，不足的是無(wú)法區(qū)分自然感染雞和免疫雞。

Jacecki-Black和King在用核苷酸探針檢測(cè)NDV的基礎(chǔ)上于1993年又建立了一種可以區(qū)分強(qiáng)毒株和弱毒株的同位素標(biāo)記寡聚核苷酸探針技術(shù)，他們檢測(cè)了36個(gè)分離株，該探針可以與所有強(qiáng)毒株雜交，而不與任何低毒力毒株結(jié)合，而且，探針與其他禽類病毒無(wú)交叉反應(yīng)+1998年Oherdorfer和Werner也報(bào)道建立了可以區(qū)分NDV的探針技術(shù)，該法可以對(duì)大量NDV樣品進(jìn)行快速篩選。

Angela等（1998）利用RT—PCR擴(kuò)增出362bp的包括F蛋白裂解位點(diǎn)序列的片段，制備成了相應(yīng)的探針，并用PCR產(chǎn)物同型特異性探針雜交來區(qū)分在德國(guó)流行的強(qiáng)弱毒株。
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