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分光光度計(jì)的測(cè)量方法主要有以下幾種方法

Lowry 法：以zui早期的 Biuret 反應(yīng)為基礎(chǔ)，并有所改進(jìn)。蛋白質(zhì)與Cu2+反應(yīng)，產(chǎn)生藍(lán)色的反應(yīng)物。但是與 Biuret相比，Lowry 法敏感性。缺點(diǎn)是需要順序加入幾種不同的反應(yīng)試劑;反應(yīng)需要的時(shí)間較長(zhǎng);容易受到非蛋白物質(zhì)的影響;含EDTA，Triton x-100，ammonia sulfate 等物質(zhì)的蛋白不適合此種方法。
BCA(Bicinchoninine acid assay)法：這是一種較新的、敏感的蛋白測(cè)試法。要分析的蛋白在堿性溶液里與Cu2+反應(yīng)產(chǎn)生 Cu+，后者與 BCA 形成螯合物，形成紫色化合物，吸收峰在 562 nm波長(zhǎng)。此化合物與蛋白濃度的線(xiàn)性關(guān)系*，反應(yīng)后形成的化合物非常穩(wěn)定。相對(duì)于 Lowry 法，操作簡(jiǎn)單，敏感度。但是與 Lowry法相似的是容易受到蛋白質(zhì)之間以及去污劑的干擾。
Bradford 法：這種方法的原理是蛋白質(zhì)與考馬斯亮蘭結(jié)合反應(yīng)，產(chǎn)生的有色化合物吸收峰595 nm。其zui大的特點(diǎn)是，敏感度好，是 Lowry 和 BCA 兩種測(cè)試方法的 2倍;操作簡(jiǎn)單，速度快;只需要一種反應(yīng)試劑;化合物可以穩(wěn)定1小時(shí)，方便結(jié)果;而且與一系列干擾 Lowry，BCA 反應(yīng)的還原劑(如DTT，巰基乙醇)相容。但是對(duì)于去污劑依然是敏感的。zui主要的缺點(diǎn)是不同的品會(huì)導(dǎo)致同一樣品的結(jié)果差異較大，無(wú)可比性。
某些初次接觸比色法測(cè)定的研究者可能為比色法測(cè)出的結(jié)果并不一致，感到迷惑，究竟該相信哪種方法?由于方法反應(yīng)的基團(tuán)以及顯色基團(tuán)不一，所以同時(shí)使用幾種方法對(duì)同一樣品得出的樣品濃度無(wú)可比性。例如：Keller 等測(cè)試人奶中的蛋白，結(jié)果 Lowry，BCA測(cè)出的濃度明顯于Bradford，差異顯著。即使是測(cè)定同一樣品，同一種比色法選擇的樣品不一致，測(cè)試后的濃度也不一致。

水分測(cè)定儀，哈爾濱宇達(dá)電子技術(shù)有限公司。