蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司
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蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司
| 參 考 價(jià) | 面議 |
產(chǎn)品型號(hào)
品 牌
廠(chǎng)商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商
所 在 地蘇州市
聯(lián)系方式：耿少華查看聯(lián)系方式
更新時(shí)間：2023-06-25 08:28:08瀏覽次數(shù)：99次
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經(jīng)營(yíng)模式：經(jīng)銷(xiāo)商
商鋪產(chǎn)品：842條
所在地區(qū)：江蘇蘇州市
聯(lián)系人：耿少華 （經(jīng)理）
用途：（1）用于大多數(shù)哺乳動(dòng)物貼壁細(xì)胞系的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建； （2）用于大多數(shù)哺乳動(dòng)物懸浮細(xì)胞系的穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建。
懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑-QuickShuttle-Superfast 快速轉(zhuǎn)染試劑
QuickShuttle-Superfast 快速轉(zhuǎn)染試劑
貨號(hào)：KX0110043
含量：0.8 ml
用途：（1）用于大多數(shù)哺乳動(dòng)物貼壁細(xì)胞系的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建（立傳立轉(zhuǎn)）；
（2）用于大多數(shù)哺乳動(dòng)物懸浮細(xì)胞系的穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建。
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 產(chǎn)品用途 |
| QuickShuttle-Basic | KX0110041 | 0.8ml | 適用于大多數(shù)哺乳動(dòng)物貼壁細(xì)胞系，可用于原代細(xì)胞和二倍體細(xì)胞 |
| QuickShuttle-Enhanced | KX0110042 | 0.8ml | 適用于大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞系，專(zhuān)用于難轉(zhuǎn)細(xì)胞系 |
| QuickShuttle-Superfast | KX0110043 | 0.8ml | 細(xì)胞消化和轉(zhuǎn)染同時(shí)進(jìn)行，立傳立轉(zhuǎn)?？捎糜趹腋〖?xì)胞 |
| QuickShuttle-293 | KX0110044 | 0.8ml | 專(zhuān)用于各種293細(xì)胞，立傳立轉(zhuǎn) |
| QuickShuttle-Hela | KX0110045 | 0.8ml | 專(zhuān)用于Hela細(xì)胞，立傳立轉(zhuǎn) |
| QuickShuttle-BHK-21 | KX0110046 | 0.8ml | 專(zhuān)用于BHK-21細(xì)胞，立傳立轉(zhuǎn) |
注意事項(xiàng)：
1. 質(zhì)粒 DNA：請(qǐng)用能夠去除內(nèi)毒素的方法制備高質(zhì)量的質(zhì)粒 DNA。
2. 稀釋液：0.85%（W/V）生理鹽水，用低內(nèi)毒素純水配制，高壓消毒或除菌過(guò)濾。
3. 培養(yǎng)基：經(jīng)過(guò) DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常規(guī)培養(yǎng)基測(cè)試，推薦使用含 5~10%牛血清的 DMEM，若轉(zhuǎn)染效果不理想可嘗試其它培養(yǎng)基。
4. 以 24 孔細(xì)胞板轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)為例，推薦每孔低內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNA 用量為 1~2µg、轉(zhuǎn)染試劑用量為 3~5µl， 請(qǐng)?jiān)谡綄?shí)驗(yàn)前根據(jù)不同細(xì)胞和不同培養(yǎng)基用報(bào)告基因進(jìn)行優(yōu)化。
5. 對(duì)于大多數(shù)哺乳動(dòng)物貼壁細(xì)胞系，立傳立轉(zhuǎn)要求使用生長(zhǎng)旺盛的細(xì)胞，即細(xì)胞生長(zhǎng)至 80-90%成片或 剛長(zhǎng)滿(mǎn)。若使用生長(zhǎng)過(guò)老的細(xì)胞，將明顯影響立傳立轉(zhuǎn)的效率。
6. 本品不推薦用于貼壁性較差的貼壁細(xì)胞系，如各種 293 細(xì)胞等。
7. 本品對(duì)大多數(shù)哺乳動(dòng)物懸浮細(xì)胞系有一定轉(zhuǎn)染效率，可用于穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建。
使用方法 ：
1. 將懸浮細(xì)胞或新鮮消化的貼壁細(xì)胞接種到 24 孔細(xì)胞板中，每孔 1~2×105細(xì)胞，1ml 培養(yǎng)基。
備 注：可在生長(zhǎng)旺盛的貼壁細(xì)胞傳代后直接按下述步驟 2~5 進(jìn)行轉(zhuǎn)染，無(wú)需 18~24 小時(shí)的等候時(shí)間。
2. 將 1~2μg 質(zhì)粒 DNA 和 3~5μl 轉(zhuǎn)染試劑分別稀釋到 50μl 生理鹽水中。備注：質(zhì)粒 DNA 和轉(zhuǎn)染試劑的 量需要根據(jù)不同細(xì)胞和不同培養(yǎng)基來(lái)優(yōu)化，但理論上不超出 1~2µg 和 3~5µl 范圍。
3. 合并上述兩溶液并混勻。備注：無(wú)需其它轉(zhuǎn)染試劑所需的 10~30 分鐘的等候時(shí)間。
4. 將上述復(fù)合物直接加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中，用加樣器吸打混勻。
備注：轉(zhuǎn)染復(fù)合物可直接加入含血清的 細(xì)胞培養(yǎng)基中進(jìn)行轉(zhuǎn)染。
5. 將細(xì)胞板移至 37oC/5% CO2 孵箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
備注：無(wú)需在轉(zhuǎn)染后 4~6 小時(shí)補(bǔ)加血清或更換培養(yǎng) 基。
6. 24~72 小時(shí)后根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行瞬時(shí)表達(dá)分析或穩(wěn)定細(xì)胞系加壓篩選。
備注：對(duì)于一些轉(zhuǎn)染效率高的 細(xì)胞系如 BHK-21 等，可在轉(zhuǎn)染后 24 小時(shí)進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
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