蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司
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所 在 地蘇州市
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更新時(shí)間：2023-06-20 08:07:55瀏覽次數(shù)：127次
聯(lián)系我時(shí)，請告知來自 儀表網(wǎng)細(xì)胞名稱：人膀胱移行細(xì)胞癌（STR鑒定正確）細(xì)胞簡稱：J82細(xì)胞細(xì)胞別名： J-82; J 82; J82COT; J82 COT貨號：TCH-C221規(guī)格：1×10?cells/T25 培養(yǎng)瓶J82細(xì)胞培養(yǎng)基貨號：TCH-G221
J82細(xì)胞
細(xì)胞名稱：人膀胱移行細(xì)胞癌（STR鑒定正確）
細(xì)胞簡稱：J82細(xì)胞
細(xì)胞別名： J-82; J 82; J82COT; J82 COT
貨號：TCH-C221
規(guī)格：1×10?cells/T25 培養(yǎng)瓶
參考目錄價(jià)格：15 00元 (干冰運(yùn)輸需另加200元干冰費(fèi))
種屬來源：人
組織來源：膀胱
特征：移行細(xì)胞癌
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
生長特性：貼壁生長
培養(yǎng)體系： MEM+10%FBS+1%P/S
J82細(xì)胞培養(yǎng)基貨號：TCH-G221
傳代比例：1:3-1:6，每2-3天換液一次
傳代周期：48-72 h
培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%CO2，溫度：37℃
凍存條件：60%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+30%FBS+10%DMSO，液氮儲存
質(zhì)量檢測：細(xì)菌、真菌、支原體檢測均為陰性
J82細(xì)胞源自一名58歲膀胱移行細(xì)胞癌的白人男性。胞內(nèi)無橋粒，有大量粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及突出絨毛，表達(dá)ras基因。
J82細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
使用配套培養(yǎng)基貨號：TCH-G221
傳代比例：1:3-1:6，每2-3天換液一次
傳代周期：48-72 h
J82細(xì)胞傳代培養(yǎng)方法：
1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基；
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細(xì)胞 10-20s，吸走潤洗的PBS；
3.T25瓶加1ml左右，輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使鋪勻瓶底細(xì)胞層；
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化；
5.消化到細(xì)胞間隙變大，但未脫落時(shí)加2-3ml培養(yǎng)基終止消化；
6.混勻細(xì)胞，900rpm離心3-5min，棄上清；
7.加新的培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里；
8.補(bǔ)足培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；
注意事項(xiàng) ：不同品牌消化時(shí)間差別較大，注意嚴(yán)格控制消化時(shí)間
消化傳代細(xì)胞時(shí)吹打細(xì)胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
J82細(xì)胞凍存操作步驟：
凍存液：可有使用海星生物的一步凍存液，使用一步凍存法進(jìn)行細(xì)胞凍存。（不需要程序降溫盒）
凍存規(guī)格 200-300萬/ml，1ml每管
如果采用程序凍存法的可以參考以下步驟：
1.消化并離心獲得細(xì)胞沉淀后，加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞；
2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管；
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒，放入-80度冰箱過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存；沒有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室，加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4 度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入 -80度過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
J82細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)：
1.凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性，若有異常，及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案
2.由于J82細(xì)胞貼壁較弱，消化時(shí)間偏短，注意控制消化時(shí)間；
3.注意控制細(xì)胞密度，過高或者過低都可能影響細(xì)胞狀態(tài)，不要長時(shí)間高密度培養(yǎng)；
4.細(xì)胞生長較快，注意及時(shí)換液及傳代；
參考文獻(xiàn)：
O'Toole CHuman bladder cancer lines: HLA Class I and Class II antigen expression and susceptibility to cytostatic and cytotoxic effects in vitroIn: O'Toole CIn vitro models for cancer researchvol. IVBoca Raton, FLCRC Presspp. 103-125.
O'Toole C, et al. Ultrastructure, karyology and immunology of a cell line originated from a human transitional-cell carcinoma. Br. J. Cancer 38: 64-76, 1978. PubMed: 687519
Fogh J. C*tion, characterization, and identification of human tumor cells with emphasis on kidney, testis, and bladder tumors. Natl. Cancer Inst. Monogr. 49: 5-9, 1978. PubMed: 571047
Bellet D, et al. Malignant transformation of nontrophoblastic cells is associated with the expression of chorionic gonadotropin beta genes normally transcribed in trophoblastic cells. Cancer Res. 57: 516-523, 1997. PubMed: 9012484
Bender CM, et al. Inhibition of DNA methylation by 5-Aza-2'-deoxycytidine suppresses the growth of human tumor cell lines. Cancer Res. 58: 95-101, 1998. PubMed: 9426064
The cells form poorly differentiated squamous cell carcinomas.
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