商品介紹：

公司所有產品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。

細胞凍存注意事項：
(1)  細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候，這時細胞生長狀態(tài)好，細胞數量也多，并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣，用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸，活細胞記數。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml )，加入已經配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻，分裝到凍存管，冷凍保存。
(2)  保護劑的使用
細胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍，再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3)  細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數細胞來說，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時，再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再轉入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4)  儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間，細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態(tài)層，因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內只能存儲少量液氮，需要經常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。

JEG-3人絨毛膜癌細胞公司正在出售的產品：

Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白4抗體  間隙連接蛋白31.1/GJB5抗體　英文名；Connexin 31.1

ADP核糖基化樣因子ARL3抗體  剪接體相關蛋白155抗體　英文名；SAP155

AF488標記人CD25單克隆抗體  劍蛋白p80抗體　英文名；katanin p80

AF647標記人CD158e1單克隆抗體  膠質母細胞瘤相關蛋白GBAS抗體　英文名；GBAS

AF680標記的叉頭蛋白P3抗體  酵母肌動蛋白（內參）抗體　英文名；Beta Actin (Yeast, Loading Control)

11號染色體開放閱讀框67抗體  核轉錄調節(jié)因子YY1 （核內參）重組兔單克隆抗體　英文名；YY1(Nuclear Loading Control)

14-3-3E蛋白抗體  黑色素瘤蛋白多糖4抗體　英文名；NG2

17β羥基類固醇脫氫酶11/17β-HSD11抗體  黑色素瘤相關抗原D4抗體　英文名；MAGD4

19號染色體開放閱讀框29抗體  環(huán)指蛋白212抗體　英文名；RNF212

1號染色體開放閱讀框105抗體  環(huán)指蛋白67抗體　英文名；NEURL

1號染色體開放閱讀框167抗體  磺胺抗體　英文名；Sulfadiazine

1號染色體開放閱讀框229抗體  活化轉錄因子4重組兔單克隆抗體　英文名；ATF4

1號染色體開放閱讀框96抗體  肌動蛋白結合蛋白2B抗體　英文名；CORO2B

20號染色體開放閱讀框177抗體  肌動蛋白依賴染色質調控因子SMARCD3蛋白抗體　英文名；SMARCD3

21號染色體開放閱讀框33抗體  肌球蛋白1B抗體　英文名；MYO1B

鋅指蛋白14抗體  小鼠抗人CD20單克隆抗體　英文名；human CD20

鋅指蛋白200抗體  心肌缺血預處理正調節(jié)蛋白2抗體　英文名；WDR26

鋅指蛋白24抗體  鋅指MIZ結構域蛋白2抗體　英文名；ZMIZ2

操作步驟:

(1) 細胞系培養(yǎng)：取6cm細胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液，37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%，密度過大，轉染后不利篩選細胞。

(2) 轉染液制備：在EP管中制備以下兩液(為轉染每一個孔細胞所用的量)

A液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質粒DNA。

B液：用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質體。

分別將A液與B液輕彈混勻，靜置5分鐘。

(3) 吸取B液加入至A液中，輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。

(4) 轉染準備：用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次，再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。

(5) 轉染：把A/B復合物緩緩加入培養(yǎng)液中，搖勻，37℃溫箱置6~24小時，吸除無血清轉染液，換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。

(6) 瞬時轉染后，可在48h-72h細胞長滿之后，提取細胞蛋白或者RNA，驗證敲減/過表達效率。