當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>細(xì)胞系>>人細(xì)胞系>> A375人惡性黑色素瘤細(xì)胞
人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;TE671 Subline No.2
貨號 | A01X643 | 規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | A01X643 | |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | A375:A375 |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹:
別稱 | A 375 |
種屬 | 人類 |
年齡(性別) | 女性,54歲 |
組織來源 | 皮膚;惡性黑色素瘤 |
生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
詳情簡介 | A-375細(xì)胞源自一位54歲女性,是由D·J·Giard等人建立的一系列細(xì)胞株中的一株。A-375細(xì)胞在抗胸腺細(xì)胞球蛋白、血清處理的NIH瑞士小鼠中形成類似于惡性黑素瘤的快速增長的皮下腫瘤;A-375在普通成纖維細(xì)胞和瓊脂上形成克隆。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:3-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時間 | ~24-32小時 |
凍存條件 | |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
培養(yǎng)條件 | |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
溫度 | 37℃ |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞凍存注意事項:
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時候,這時細(xì)胞生長狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細(xì)胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Rho鳥苷酸交換因子2重組兔單克隆抗體 英文名;GEF H1 結(jié)構(gòu)蛋白家族1抗體
RNA結(jié)合蛋白34抗體 英文名;RBM34 金屬磷酸酯酶1抗體
RNA聚合酶I抗體 英文名;UBF1 緊密連接蛋白7重組兔單克隆抗體
p53和DNA損傷調(diào)節(jié)蛋白1抗體 英文名;PDRG1 環(huán)指蛋白210抗體
Pacific Blue標(biāo)記人CD15單克隆抗體 英文名;human CD15 (SSEA-1)/Pacific Blue 環(huán)指蛋白61抗體
Pacific Blue標(biāo)記小鼠NK1.1單克隆抗體 英文名;mouse NK1.1/Pacific Blue 黃體激素釋放激素類似物抗體
PDZ連接激酶/T-LAK細(xì)胞源蛋白激酶抗體 英文名;PBK/TOPK 活化轉(zhuǎn)錄因子3抗體
PE-Cy5標(biāo)記人CD62E/CD62P單克隆抗體 英文名;human CD62E/CD62P/PE-Cy5 肌動蛋白結(jié)合蛋白1抗體
PE-Cy5標(biāo)記小鼠Ly-6G/Ly-6C單克隆抗體 英文名;mouse Ly-6G/Ly-6C/PE-Cy5 肌動蛋白樣蛋白6B抗體
PE-Cy7標(biāo)記人CD71單克隆抗體 英文名;human CD71/PE-Cy7 肌球蛋白16/Myosin XVI抗體
PerCP-Cy5.5標(biāo)記人CD127 (IL7R)單克隆抗體 英文名;human CD127 (IL7R)/PerCP-Cy5.5 肌球蛋白輕鏈激酶抗體
A375人惡性黑色素瘤細(xì)胞PerCP標(biāo)記的腺苷A2b受體/神經(jīng)生長因子1受體抗體 英文名;ADORA2B, PerCP conjugated 肌微管素相關(guān)蛋白11抗體
PE標(biāo)記人CD11c單克隆抗體 英文名;human CD11c/PE 雞新城疫血凝素抗體
磷酸化P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑抗體 英文名;phospho-CDKN1B (Thr157)
磷酸化Src原癌基因重組兔單克隆抗體 英文名;phospho-Src (Tyr419)
磷酸化氨基末端激酶1/2/3重組兔單克隆抗體 英文名;Phospho-JNK1/2/3(T183+T183+T221)
磷酸化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗體 英文名;phospho-KLF5 (Ser311)
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細(xì)胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長滿之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達效率。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。