當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TADH人乙醇脫氫酶ELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | ADH人乙醇脫氫酶ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human alcohol dehydrogenase, ADH Elisa Kit |
貨號 | FS-H63797 |
公司“質量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Aspergillus phoenicis 海棗曲霉Aspergillus phoenicis凍干物安全等級:1模式菌株:noType strain of A. saitoi綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然。生長條件:25-28℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Cephalosporium│sp. 頭孢霉Cephalosporium│sp.分離基物:冬蟲夏草斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:15℃存儲條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:97%
Gluconacetobacr xylinum 木醋桿菌Gluconacetobacr xylinum凍干物安全等級:1Type strain;細菌纖維素醋菌培養(yǎng)基:葡萄糖100.0g ,酵母提取物 10.0 g ,CaCO3 20.0 g ,瓊脂15.0 g ,蒸餾,1.0 L ,pH 6.8生長條件:30℃,好氧存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:99%
Pediococcus pentosaceus 戊糖片球菌Pediococcus pentosaceus凍干物安全等級:1模式菌株:MRS生長條件:37℃,兼性厭氧存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:99%
Cystobacr│violaceus 紫色孢囊桿菌Cystobacr│violaceus凍干物安全等級:1模式菌株:no作為粘細菌聚合酶的的基因篩選庫,分析和篩選聚基因的多樣性844生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法 純度:98%
Nannocystis│exedens 侵蝕侏儒囊菌Nannocystis│exedens凍干物安全等級:1模式菌株:no作為粘細菌聚合酶的的基因篩選庫,分析和篩選聚基因的多樣性844生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法 純度:98%
Myxococcus│stipitatus 葉柄粘球菌Myxococcus│stipitatus分離基物:兔糞粒斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no粘細菌分類及菌庫構建844生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法 純度:AR,80%
Myxococcus│fulvus 橙色粘球菌Myxococcus│fulvus分離基物:楊樹皮斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no粘細菌分類及藥物篩選847生長條件:30℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法 純度:AR,80%
ADH人乙醇脫氫酶ELISA試劑盒實驗原理phospho-STAT1 (Ser727) 磷化信號轉導與轉錄激活因子1抗體α-1抗胰糜蛋白酶抗體4-溴-2,6-二胺Mouse CBX3 (Chromobox Homolog 3) ELISA Kit
STAT2 信號轉導和轉錄激活因子2抗體α-1抗胰蛋白酶抗體4-溴-2,6-二胺Mouse CHD3 (Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 3) ELISA Kit
Phospho-Stat2 (Tyr690) 磷化信號轉導和轉錄激活因子2抗體ATP結合蛋白家族6抗體Grubbs 2 代催化劑Mouse CHD5 (Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 5) ELISA Kit
STEAP1 前列腺跨膜上皮1抗原抗體三磷腺苷結合盒亞家族G1抗體Grubbs 2 代催化劑Mouse CNTF (Ciliary Neurotrophic Factor) ELISA Kit
phospho-STAT3 (Thr705) 磷化信號轉導和轉錄激活因子3抗體脂聯(lián)素受體2抗體Grubbs 2 代催化劑Mouse CROP (Cisplatin Resistance Associated Overexpressed Protein) ELISA Kit
phospho-STAT3 (Ser727) 磷化信號轉導和轉錄激活因子3抗體ANGEL1蛋白抗體L-苯氨芐酯鹽鹽Mouse C-jun ELISA Kit
phospho-STAT5a(Tyr694) 磷化信號轉導和轉錄激活因子5a抗體ANGEL2蛋白抗體L-苯氨芐酯鹽鹽Mouse CC17 (Clara Cell Protein) ELISA Kit
phospho-STAT6(Tyr641) 磷化信號轉導和轉錄激活因子6抗體ANKLE2蛋白抗體L-苯氨芐酯鹽鹽Mouse CD3 (Cluster of differentiation 3) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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