一、概念不同

1、細胞株：細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細胞株（Cell Strain）。

2、細胞系：細胞系（cell line）指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。 也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。

二、形成方法不同

1、細胞株：通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物成為細胞株。

2、細胞系：經(jīng)過40-50次分裂的渡過第二次死亡危機，原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功成為細胞系。

三、細胞的延續(xù)性不同

1、細胞株：原代培養(yǎng)的細胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了，細胞的生長就會出現(xiàn)停滯，大部分細胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去，這些存活的細胞一般能夠傳到40--50代，這種傳代細胞叫做細胞株。

2、細胞系：細胞株的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變。當(dāng)細胞傳至50代以后又會出現(xiàn)“危機"，不能再傳下去。但是有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變，并且?guī)в邪┳兊奶攸c，有可能在培養(yǎng)條件下無限制地傳代下去，這種傳代細胞稱為細胞系。

A-375人黑素瘤細胞

細胞培養(yǎng)的步驟：

細胞培養(yǎng)前的準(zhǔn)備

細胞變質(zhì)的征象包括核周出現(xiàn)顆粒、細胞與基質(zhì)解離以及細胞質(zhì)空泡形成。

這些變質(zhì)征象可能為多種原因所致，例如：培養(yǎng)物污染、細胞系衰老或培養(yǎng)基中存在毒性物質(zhì)，或者這些征象僅表明培養(yǎng)物需要更換培養(yǎng)基。

變質(zhì)嚴(yán)重時將會成為不可逆的變化。

細胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥的消毒及布局

保持細胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥內(nèi)的整潔有序，將所有物品置于直視范圍內(nèi)。

向放入通風(fēng)櫥內(nèi)的所有物品噴灑70%乙醇，擦拭清潔進行消毒。

在通風(fēng)櫥中部開闊處放置細胞培養(yǎng)容器；移液器置于右前方易于取用；試劑和培養(yǎng)基置于右后方便于吸??；試管架置于中后部；小型容器置于左后部用于盛放廢液。

培養(yǎng)瓶/皿等物品的無菌操作

細胞培養(yǎng)污染物主要分為兩類：

化學(xué)污染物,如培養(yǎng)基、血清和水中的雜質(zhì)、內(nèi)毒素、增塑劑和去污劑。

生物污染物，如細菌、霉菌、酵母、病毒、支原體以及其他細胞系的交叉污染。

可通過充分了解污染源以及采用良好的無菌技術(shù)，降低污染發(fā)生的頻率和嚴(yán)重程度。

交叉污染的確認(rèn)

為細胞換液時，要沿著培養(yǎng)瓶的一側(cè)輕輕地加入，而不是直接加到細胞中，以免損傷細胞，當(dāng)培養(yǎng)的細胞株較為脆弱時尤其需要注意。

使用無菌玻璃吸管或一次性塑料吸管和移液器操作液體時，每支吸管只能使用一次，以免交叉污染。

細胞傳代的時間把握

當(dāng)細胞呈指數(shù)增殖，貼壁培養(yǎng)的細胞已占據(jù)所有可用基質(zhì)、沒有擴增空間，或懸浮培養(yǎng)的細胞已超過培養(yǎng)基質(zhì)所支撐的能力，無法進一步生長時，細胞增殖速度將大大降低甚至停止。為了將細胞密度維持在最佳水平，以便細胞繼續(xù)生長，并且刺激進一步增殖，必須對細胞進行傳代。

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