當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>其它ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96T附睪分泌蛋白4ELISA試劑盒免費(fèi)代測
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
公司產(chǎn)品僅用于科研
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
附睪分泌蛋白4ELISA試劑盒免費(fèi)代測 | epididymis protein4 | FS-P65229 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
轉(zhuǎn)錄因子ERF抗體產(chǎn)品別名: 4-苯甲辛(標(biāo)準(zhǔn)品)
磷化轉(zhuǎn)錄因子ERF抗體產(chǎn)品別名: 烷二甲絡(luò)合物唑(標(biāo)準(zhǔn)品)
真核肽鏈釋放因子1抗體產(chǎn)品別名: N,N-二乙苯烷復(fù)合物唑雜質(zhì)(標(biāo)準(zhǔn)品)
真核肽鏈釋放因子3a抗體產(chǎn)品別名: (S)-Α-甲-4-硝芐鹽鹽柳酚,利膽酚(標(biāo)準(zhǔn)品)
表皮生長因子受體底物15抗體產(chǎn)品別名: (4-甲氧芐)甲六氟異(標(biāo)準(zhǔn)品)
內(nèi)吞作用輔助蛋白EPN1抗體產(chǎn)品別名: 顏料綠 7六甲蜜(標(biāo)準(zhǔn)品)
內(nèi)吞作用輔助蛋白EPN2抗體產(chǎn)品別名: 1-萘乙苯靈(標(biāo)準(zhǔn)品)
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位蛋白ERGI3抗體產(chǎn)品別名: 2--4-硝三氟甲苯波必利(標(biāo)準(zhǔn)品)
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氧化物蛋白Ero1-Lα抗體產(chǎn)品別名: 聚合化鋁氮平(標(biāo)準(zhǔn)品)
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白ERp19抗體產(chǎn)品別名: 3,5-二氟苯乙羥喹(標(biāo)準(zhǔn)品)
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白ERp72抗體產(chǎn)品別名: 2-溴-3-氟苯甲羥喹系統(tǒng)適用性試驗(yàn)對照品
結(jié)核分枝桿菌分泌性蛋白ESAT6抗體產(chǎn)品別名: 3-氨-2-硝吡啶法齊明(標(biāo)準(zhǔn)品)
真核翻譯起始因子1抗體產(chǎn)品別名: 2-二苯膦-6-甲吡啶化膽堿(標(biāo)準(zhǔn)品)
上皮粘連調(diào)控蛋白ESRP2抗體產(chǎn)品別名: 1-甲氧羰酰氨-7-萘酚化琥珀酰膽堿(標(biāo)準(zhǔn)品)
T和嗜性粒表達(dá)特應(yīng)性皮炎蛋白ETEA抗體產(chǎn)品別名: N-異-4-甲酰苯甲?;?biāo)準(zhǔn)品)
附睪分泌蛋白4ELISA試劑盒免費(fèi)代測Human DGAT1(Diacylglycerol O-acyltransferase 1) ELISA Kit扭曲毛殼拉丁屬名: Chaetomium crispatum
Human CSNK2A2(Casein Kinase 2, alpha 2 Polypeptide) ELISA Kit*蛹蟲草注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human CTAPIII(Connective Tissue Activating Peptide III) ELISA Kit米曲霉拉丁屬名: Aspergillus oryzae
Human CX26(Connexin 26) ELISA Kit釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Human COL5α2(Collagen Type V Alpha 2) ELISA Kit釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Human COL6(Collagen Type VI) ELISA Kit泡盛曲霉拉丁屬名: Aspergillus awamori
Human CX40(Connexin 40) ELISA Kit赭黃裸傘注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human COL6α1(Collagen Type VI Alpha 1) ELISA Kit沙漠奇異球菌拉丁屬名: Deinococcus deserti
Human COL6α3(Collagen Type VI Alpha 3) ELISA Kit大腸埃希菌拉丁屬名: coli
Human COL8α1(Collagen Type VIII Alpha 1) ELISA Kit乳桿菌屬拉丁屬名: Lactobacillus sp.
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