當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TPLCγ1人磷酯酶Cγ鏈ELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產(chǎn)品名稱 | PLCγ1人磷酯酶Cγ鏈ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Phospholipase Cγ1, PLCγ1 Elisa Kit |
貨號 | FS-H63830 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Bacillus│aryabhattai 阿耶波多氏芽孢桿菌Bacillus│aryabhattai分離基物:樣/海(-1810m,原位富集1年)斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no有機物降解菌/可降解甘蔗渣(單菌驗證)471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:99%
Alcanivorax│dieselolei 柴油食烷菌Alcanivorax│dieselolei分離基物:表層海凍干物安全等級:1降解石油烴223生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:≥98%
Brevibacrium│permense 彼爾姆短桿菌Brevibacrium│permense分離基物:沉積物/深海沉積物凍干物安全等級:1模式菌株:no無機污染物抗性菌/抗二價錳Mn 產(chǎn)酶微生物/ 蛋白酶472生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:98%
其它其它 純度:98%
Verticillium│albo-atrum 黃萎輪枝孢Verticillium│albo-atrum凍干物安全等級:1模式菌株:no棉花黃萎病測定。91生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:99%
Rhizopus│reflexus 點頭根霉Rhizopus│reflexus凍干物安全等級:1模式菌株:no產(chǎn)延胡索14生長條件:25-28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:99%
Rhizopus│cohnii 科恩根霉Rhizopus│cohnii凍干物安全等級:1模式菌株:no17生長條件:25-28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:99%
Paecilomyces│sp. 擬青霉Paecilomyces│sp.凍干物安全等級:1模式菌株:no產(chǎn)生纖維素酶14生長條件:25-28℃存儲條件:液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法 純度:97%
PLCγ1人磷酯酶Cγ鏈ELISA試劑盒實驗原理Phospho-TLK1 (Ser695) 磷化調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1抗體干擾素誘導蛋白AIM2抗體2-芴Mouse DLD (Dihydrolipoyl Dehydrogenase) ELISA Kit
TLR1 Toll樣受體1抗體水通道蛋白-2抗體2-芴Mouse DLAT (Dihydrolipoyl Transacetylase) ELISA Kit
TLR2/CD282 Toll樣受體2抗體腫瘤抑制基因ABI2/精氨酪氨蛋白激酶結合蛋白抗體2-芴Mouse DPPIV (dipeptidyl peptldase IV) ELISA Kit
TLR3 Toll樣受體3抗體ADP核糖基化因子樣11抗體2,5-二甲氧基溴苯Mouse D-LDH (D-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit
TLR4/CD284 Toll樣受體4抗體ARM重復X連鎖蛋白ARMCX3抗體2,5-二甲氧基溴苯Mouse D1R (Dopamine D1 receptor) ELISA Kit
TLR5 Toll樣受體5抗體ARM重復X連鎖蛋白ARMCX1抗體代磷二苯酯Mouse DRD3 (Dopamine Receptor D3) ELISA Kit
TLR6/CD286 Toll樣受體6抗體ARM重復X連鎖蛋白ARMCX2抗體代磷二苯酯Mouse DRD4 (Dopamine Receptor D4) ELISA Kit
TLR9/CD289 Toll樣受體9抗體自噬相關蛋白10抗體代磷二苯酯Mouse DAT (Dopamine Transporter) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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