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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TVIP人血管活性腸肽ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
PCDH1人原鈣黏素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
LTA人淋巴毒素αELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ALDH人乙醛脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
FⅫ人凝血因子ⅫELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | VIP人血管活性腸肽ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human Motilin, MTL Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H63440 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
Hygrophorus│russula (Schaeff.) Kauffman 紅菇蠟傘Hygrophorus│russula (Schaeff.) Kauffman分離基物:子實(shí)體斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no150生長條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:97%
Bacillus anthracis Cohn 炭疽芽孢桿菌Bacillus anthracis Cohn分離基物:果實(shí)皮層凍干安全等級(jí):1模式菌株:no營養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生長條件:37℃,好氧存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:95%
Streptomyces│sindenensis Nakazawa and Fujii 仙臺(tái)鏈霉菌Streptomyces│sindenensis Nakazawa and Fujii分離基物:喜樹斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no12生長條件:28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%
Penicillium│lanosum Westling 羊毛狀青霉Penicillium│lanosum Westling分離基物:樟子松根系土壤斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%
Tyromyces│lacus (Fr.) Murrill 蹄形干酪菌Tyromyces│lacus (Fr.) Murrill分離基物:闊葉樹樹枝斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%
Alrnaria│catalpae (Ellis & Mont.) P. Joly 梓鏈格孢Alrnaria│catalpae (Ellis & Mont.) P. Joly分離基物:梓樹葉部斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%
Alrnaria│cerasi Pobnia 櫻桃鏈格孢Alrnaria│cerasi Pobnia分離基物:榆葉梅葉部斜面培養(yǎng)物模式菌株:no14生長條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:97%
Alrnaria│rosicola (V.G. Rao) T.Y. Zhang & Y.L. Guo 薔薇生鏈格孢Alrnaria│rosicola (V.G. Rao) T.Y. Zhang & Y.L. Guo分離基物:玫瑰葉部斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:97%
VIP人血管活性腸肽ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理CNGA2 環(huán)核苷陽離子通道蛋白α2抗體橙皮苷十一烷酰Human bFGF/FGF2 (Basic Fibroblast Growth Factor) ELISA Kit
CANX 鈣連蛋白抗體柚皮苷2-溴-1-茚滿Human AP (Aprotinin) ELISA Kit
CNP/CNPase C型鈉尿肽抗體甘草次2-溴-1-茚滿Human APT (Abnormal Prothrombin) ELISA Kit
CNR-1 鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1抗體去氧膽4-(二乙氨基)Human ITIH4 (Inter Alpha-Globulin Inhibitor H4) ELISA Kit
CNTFR Alpha 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α抗體丁香酚4-(二乙氨基)Human AQP-1 (Aquaporin 1) ELISA Kit
CNR-2/PCDHA 6 鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體2抗體延胡索乙素4-(二乙氨基)Human AQP-2 (Aquaporin 2) ELISA Kit
CNTF 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體辛弗林2-氨基-5-硝基二苯Human AQP-3 (Aquaporin 3) ELISA Kit
cofilin 絲切蛋白抗體薄荷腦2-氨基-5-硝基二苯Human AQP-4 (Aquaporin 4) ELISA Kit
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