商品介紹：

僅供科研實驗，不做其他用途！

HPLC注意事項：

1.流動相必須用HPLC級的試劑，使用前過濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用0.45um或更細(xì)的膜過濾)。

2.流動相過濾后要用超聲波脫氣，脫氣后應(yīng)該恢復(fù)到室溫后使用。

3.不能用純乙腈作為流動相，這樣會使單向閥粘住而導(dǎo)致泵不進(jìn)液。

4.使用緩沖溶液時，做完樣品后應(yīng)立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時，然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上，以充分洗去離子。對于柱塞桿外部，做完樣品后也必須用去離子水沖洗20ml以上。

5.長時間不用儀器，應(yīng)該將柱子取下用堵頭封好保存，注意不能用純水保存柱子，而應(yīng)該用有機(jī)相(如甲醇等)，因為純水易長霉。

6.每次做完樣品后應(yīng)該用溶解樣品的溶劑清洗進(jìn)樣器。

7.C18柱不能進(jìn)蛋白樣品，血樣、生物樣品。

8.堵塞導(dǎo)致壓力太大，按預(yù)柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查并清洗，清洗方法；①以異丙醇作溶劑沖洗：②放在異丙醇中間用超聲波清洗；

9.氣泡會致使壓力不穩(wěn)，重現(xiàn)性差，所以在使用過程中要盡量避免產(chǎn)生氣泡。

10.如果進(jìn)液管內(nèi)不進(jìn)液體時，要使用注射器吸液：通常在輸液前要進(jìn)行流動相的清。

11.要注意柱子的PH值范圍，不得注射強(qiáng)酸強(qiáng)堿的樣品，特別是堿性樣品。

12.更換流動相時應(yīng)該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗，然后插入新的流動相中。

胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK/CXCL14)Human KLHDC4 ELISA Kit羅倫氏隱球酵母

B-淋巴趨化因子1(BLC-1/CXCL13) Human KLHL32 ELISA Kit用途: 產(chǎn)正放線，G57可防治多種植物真菌病害惡臭醋桿菌

結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ) Human KLHL35 ELISA Kit金黃色亞種

免疫球蛋白A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89) Human KLHL34 ELISA Kit英文名稱: Modestobacter multiseptatus阿舒假囊酵母

免疫球蛋白E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23) Human KRT12 ELISA Kit純黃絲衣霉

免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16) Human KLHL10 ELISA Kit英文名稱: Arthrobacter phenanthrenivorans紅冬孢酵母

免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32) Human KRT33B ELISA Kit英文名稱: Pseudomonas  frederiksbergensis大核青霉

免疫球蛋白G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64) Human KRT34 ELISA Kit英文名稱: Cunninghamella echinulata橘灰青霉

粒趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)Human KRT36 ELISA Kit用途: 昆蟲防治研究色褐鏈霉菌

ω干擾(IFN-ω/IFNB)Human KLHL4 ELISA Kit英文名稱: Streptomyces canus宋氏志賀氏菌（暫無）

糖基化依賴的黏附分子(GlyCAM-1) Human KLHL9 ELISA Kit英文名稱: Saccharomyces  cerevisiae季也蒙畢赤酵母

干擾調(diào)節(jié)因子(IRF) Human KLRF1 ELISA Kit英文名稱: Bacillus sp.偶發(fā)分枝桿菌偶發(fā)亞種

淋巴β(LTB) Human KRT40 ELISA Kit威氏李斯特氏菌

淋巴α(LTA) Human KPNA1 ELISA Kit英文名稱: Halosimplex carlsbadense布氏假單胞菌

CC趨化因子受體1(CCR1)Human KLRG1 ELISA Kit英文名稱: Syncephalastrum monosporum佐氏庫特氏菌

CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)Human KLHL28 ELISA Kit英文名稱: Deinococcus sp.熱帶伯克霍爾德氏菌

蘋果脫氫1(MDH1)免疫試劑盒磷化腫瘤易感候選基因3抗體硫皮膚(DS) 羅漢松黃 A.

平滑肌肌動蛋白(SMA)免疫試劑盒磷化CREB-1抗體硫皮膚(DS) 洛柯

嘌呤核磷化(PNP)免疫試劑盒磷化CREB-1抗體硫類肝(HS) 駱駝蓬

脾臟酪激(Syk)免疫試劑盒磷化周期依賴性激6抗體硫類肝(HS) 落葉松樹脂
鬧羊花毒素V標(biāo)準(zhǔn)品Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit

產(chǎn)品規(guī)格：50次

發(fā)貨周期：1～3天

本試劑盒是一種采用Annexin V-Alexa Fluor 488與PI雙染法進(jìn)行細(xì)胞早期凋亡分析的檢測試劑盒。

細(xì)胞凋亡早期改變發(fā)生在細(xì)胞膜表面，這些細(xì)胞膜表面的改變之一是磷脂酰絲氨(PS)從細(xì)胞膜內(nèi)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜外，使PS暴露在細(xì)胞膜外表面。PS是一種帶負(fù)電荷的磷脂，正常主要存在于細(xì)胞膜的內(nèi)面，在細(xì)胞發(fā)生凋亡時細(xì)胞膜上的這種磷脂分布的不對稱性被破壞而使PS暴露在細(xì)胞膜外。Annexin V具有易于結(jié)合到磷脂類如PS的特性，對PS有高度的親和性。因此，該蛋白可充當(dāng)一敏感的探針檢測暴露在細(xì)胞膜表面的PS。PS轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜外不是凋亡所*的，也可發(fā)生在細(xì)胞壞死中。兩種細(xì)胞死亡方式間的差別是在凋亡的初始階段細(xì)胞膜是完好的，而細(xì)胞壞死在其早期階段細(xì)胞膜的完整性就被破壞。另外一種活細(xì)胞非透過性熒光染料碘化丙啶不能通過完整的活細(xì)胞，但能夠?qū)乃篮偷蛲鐾砥诘募?xì)胞進(jìn)行染色， 因此通常將Annexin V與PI配合染色， 以區(qū)別凋亡早期細(xì)胞與壞死細(xì)胞和凋亡的晚期細(xì)胞。

操作步驟：

1、細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備：

a．對于貼壁細(xì)胞：小心收集細(xì)胞培養(yǎng)液到一離心管內(nèi)備用。用胰消化細(xì)胞，至細(xì)胞可以被輕輕用移液管或槍頭吹打下來時，加入前面收集的細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下所有的貼壁細(xì)胞，并輕輕吹散細(xì)胞。再次收集到離心管內(nèi)。1000×g左右離心3-5分鐘，沉淀細(xì)胞。對于特定的細(xì)胞，如果細(xì)胞沉淀不充分，可以適當(dāng)延長離心時間或稍稍加大離心力。小心吸除上清，可以殘留約50μl左右的培養(yǎng)液，以避免吸走細(xì)胞。加入約1ml 4℃預(yù)冷的PBS，重懸細(xì)胞，再次離心沉淀細(xì)胞，小心吸除上清。再次加入1ml 4℃預(yù)冷的PBS，重懸細(xì)胞，再次離心沉淀細(xì)胞。

b．對于懸浮細(xì)胞：1000×g左右離心3-5分鐘，沉淀細(xì)胞。對于特定的細(xì)胞，如果細(xì)胞沉淀不充分，可以適當(dāng)延長離心時間或稍稍加大離心力。小心吸除上清，可以殘留約50微升左右的培養(yǎng)液，以避免吸走細(xì)胞。加入約1ml 4℃預(yù)冷的PBS，重懸細(xì)胞，并轉(zhuǎn)移到1.5毫升離心管內(nèi)。再次離心沉淀細(xì)胞，小心吸除上清，可以殘留約50μl左右的PBS，以避免吸走細(xì)胞。再次加入1ml 4℃預(yù)冷的PBS，重懸細(xì)胞，再次離心沉淀細(xì)胞。

2、用去離子水按1:3稀釋Binding Buffer(4ml Binding Buffer +12ml 去離子水)。

3、用 250μl Binding Buffer重新懸浮細(xì)胞，調(diào)節(jié)其濃度為 1×106/ml。

4、取 100μl的細(xì)胞懸液于 5ml 流式管中，加入 5μl Annexin V-Alexa Fluor 488 和10μl 20μg/ml的PI溶液。

5、混勻后于室溫避光孵育 15 分鐘。

6、在反應(yīng)管中加 400μl PBS，流式細(xì)胞儀(FACS)分析。

Annexin V-Alexa Fluor 488 PI雙染流式分析圖譜

Jurkat細(xì)胞用誘導(dǎo)凋亡后用Annexin V-Alexa Fluor 488/PI雙染流式分析圖譜

儲存條件：2～8℃，避光保存
注意事項：

①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用.