當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>其它ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96T血管生長素ELISA試劑盒
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
血管生長素ELISA試劑盒 | Angiogenin | FS-P65990 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
磷化G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白1抗體Anti-PKN2 /FITC 熒光素標(biāo)記蛋白激酶N2抗體IgG阿折地平歸巢關(guān)聯(lián)黏附分子(HCAM)ELISA試劑盒
磷化G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白1Anti-HSP-70/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記熱休克蛋白70抗體IgG噻奈普汀;噻奈普汀胱天蛋白酶激活脫氧核糖核酶(CAD)ELISA試劑盒
葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白抗體Anti-PKR/FITC 熒光素標(biāo)記蛋白激酶R/雙鏈RNA依賴蛋白激酶抗體IgG噻奈普汀;噻奈普汀(標(biāo)準(zhǔn)品)胱天蛋白酶9(P9)ELISA試劑盒
GTP結(jié)合蛋白10抗體Anti-Phospho-PKR (Thr446) /FITC 熒光素標(biāo)記磷化蛋白激酶R抗體IgG噻奈普汀鈉鹽胱天蛋白酶8(P8)ELISA試劑盒
磷化Ras GTP酶活化蛋白結(jié)合蛋白1抗體Anti-Phospho-PKR (Thr451) /FITC 熒光素標(biāo)記磷化蛋白激酶R抗體IgGD-谷氨酰胱天蛋白酶7(P7)ELISA試劑盒
Ras GTP酶活化蛋白結(jié)合蛋白1抗體Anti-Phospho-PKR (Thr446/451) /FITC 熒光素標(biāo)記磷化蛋白激酶R抗體IgG扎托布洛芬胱天蛋白酶6(P6)ELISA試劑盒
γ氨丁γ2受體/GABAA Rγ2抗體Anti-Phospho-PRK1 (Thr774)/PRK2 (Thr816) /FITC 熒光素標(biāo)記磷化內(nèi)分泌腺衍生血管內(nèi)皮生長因子抗體IgG甘膽鈉 ;甘氨膽鈉胱天蛋白酶5(P5)ELISA試劑盒
磷化糖原合酶激酶3β抗體Anti-HSP-90 Alpha/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記熱休克蛋白90α抗體IgG甘露;D-甘露糖胱天蛋白酶4(P4)ELISA試劑盒
磷化G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白1抗體Anti-HSP-90 Beta /HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記熱休克蛋白90β抗體IgGD-半胱氨鹽鹽一水胱天蛋白酶3(P3)ELISA試劑盒
磷化珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體Anti-CD4/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記CD4抗體IgG鈣蛋白酶抑制劑II(進口)胱天蛋白酶2(P2)ELISA試劑盒
磷化珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體Anti-Insulin/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記胰島素抗體IgG炔孕酮/素(標(biāo)準(zhǔn)品)胱天蛋白酶14(P14)ELISA試劑盒
G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白1抗體Anti-PLAU/uPA/FITC 熒光素標(biāo)記尿激酶型纖溶酶原激活因子抗體IgG炔孕酮/素胱天蛋白酶12(P12)ELISA試劑盒
磷化GATA結(jié)合蛋白6抗體Anti-Plectin/FITC 熒光素標(biāo)記網(wǎng)蛋白抗體IgGD-胱氨胱天蛋白酶11(P11)ELISA試劑盒
磷化γ氨丁γ2受體/GABAA Rγ2抗體Anti-PLAUR/uPAR/FITC 熒光素標(biāo)記尿激酶型纖溶酶原激活因子受體抗體IgGDL-色氨胱天蛋白酶1(P1)ELISA試劑盒
胰高血糖素受體抗體Anti-Plexin A1/Plexin 1/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)叢蛋白A1抗體IgGDL-絲氨光導(dǎo)蛋白(PDC)ELISA試劑盒
血管生長素ELISA試劑盒Anti-GSTA1/A2/A3/A4/A5 Antibody側(cè)孢短芽孢桿菌拉丁屬名: Brevibacillus laterosporus
Anti-GSR Antibody總狀共頭霉注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Anti-GSTA1/A2/A3/A4/A5 AntibodyLysinibacillus拉丁屬名: Lysinibacillus sp.
Anti-Gsta3 Antibody硬結(jié)桿菌拉丁屬名: Arthrobacter scleromae
Anti-GSTM1 Antibody異常威克漢姆酵母拉丁屬名: Wickerhamomyces anomalus
Anti-GSTA1/A2/A3/A4/A5 Antibody空腸彎曲桿菌拉丁屬名: jejuni
Anti-GSTM3 Antibody高山被孢霉拉丁屬名: Mortierella alpina
Anti-GSTP1 Antibody紫色紅曲拉丁屬名: Monascus purpureus
Anti-GSTT1 AntibodypLVX Tre3G拉丁屬名: 宿主:DH5α,BL21
Anti-GUSB Antibody釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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