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貨號 | A01X1112 | 規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
產(chǎn)品名稱 | TC-1小鼠肺上皮細(xì)胞 | 貨號 | A01X1112 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | TC1:TC-1 |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹:
別稱 | TC-1[JHU-1] |
生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
生長培養(yǎng)基 | MEM+10% FBS+1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
溫度 | 37℃ |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞凍存注意事項:
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時候,這時細(xì)胞生長狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護(hù)劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因為這樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產(chǎn)品:
HBcAb(Mouse hepatitis B virus core antibody) ELISA Kit 小鼠乙型肝炎核心抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Caspase-12/FITC 熒光素標(biāo)記半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ELAVL3/HuC 副綜合癥小腦變性相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Plant zeatin riboside,ZR ELISA Kit 植物玉米索核苷 96T
MLT5 英文名稱: 特異性MLT5蛋白抗體 0.2ml
ACBD6 英文名稱: ?;Y(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 0.2ml
Anti-Caspase-12/FITC 熒光素標(biāo)記半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rat reduced glutathione,GSH ELISA Kit 大鼠還原型Multi-class antibodies規(guī)格: 96T
Anti-BDNF/FITC 熒光素標(biāo)記BDNF蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ERK1/2(p44/42 MAPK) 原活化蛋白激酶1/2抗體 規(guī)格 0.1ml
PGR ELISA Kit 大鼠孕酮受體 96T
MLLT11 英文名稱: 髓系/淋巴或混合型白血病11抗體 0.2ml
ASZ1 英文名稱: 錨定蛋白樣蛋白1抗體 0.2ml
Anti-BDNF/FITC 熒光素標(biāo)記BDNF蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Mouse anti-zona pellucida antibody,aZP ELISA Kit 小鼠抗透明帶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-BRCA1(human)/FITC 熒光素標(biāo)記癌易感基因1抗體(人)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh EphA6/Eph receptor A6 酪蛋白激酶受體A6抗體 規(guī)格 0.2ml
PROGR ELISA kit 大鼠孕酮受體 96T
MLL5 英文名稱: 髓系/淋巴混合譜系白血病蛋白5抗體 0.2ml
ANKRD9 英文名稱: 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體 0.2ml
Anti-BRCA1(human)/FITC 熒光素標(biāo)記癌易感基因1抗體(人)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ICAM-1/CD54 ELISA KIT 大鼠細(xì)胞間粘附分子1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti- Phospho-BAP1 (p-Ser592)(human) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人0酸化癌易感基因1抗體(人)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ET-1 內(nèi)皮素-1抗體 規(guī)格 0.1ml
Plant Vitamin D,VD ELISA Kit 植物D 96T
MLK3 英文名稱: 絲酸/蘇酸蛋白激酶MLK3抗體 0.1ml
Angiopoietin 4 英文名稱: 血管生成素3/血管生成素4抗體 0.1ml
Anti- Phospho-BAP1 (p-Ser592)(human) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人0酸化癌易感基因1抗體(人)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
ALCAM ELISA Kit 大鼠白細(xì)胞活化黏附因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ARF6/FITC 熒光素標(biāo)記ADP核糖基化因子6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM153B FAM153B蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
MHC- III /H-2 III (Mouse major histocompatibility complex- III ) ELISA Kit 小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類 96T
TC-1小鼠肺上皮細(xì)胞MLH1 英文名稱: 錯配修復(fù)蛋白1抗體 0.1ml
phospho-alpha Adducin (Thr445) 英文名稱: 0酸化內(nèi)收蛋白抗體 0.1ml
Anti-ARF6/FITC 熒光素標(biāo)記ADP核糖基化因子6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細(xì)胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長滿之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達(dá)效率。
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