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貨號 | AXB6307 | 規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁細胞 |
產(chǎn)品名稱 | HLE人肝癌細胞 | 貨號 | AXB6307 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | HLE:HLE |
分類 | 人細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹:
年齡(性別) | 64歲 |
組織來源 | 肝臟,膽囊 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
生長培養(yǎng)基 | DMEM+ 10% FBS+ 1% P/S |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存液 | 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
溫度 | 液氮 |
氣相 | 空氣,95%;CO2,5% |
溫度 | 37℃ |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞凍存注意事項:
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候,這時細胞生長狀態(tài)好,細胞數(shù)量也多,并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸,活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產(chǎn)品:
TSGF(Mouse Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor) ELISA KIT 小鼠特異生長因子/相關(guān)因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CD26/ADCP2/DPP IV /FITC 熒光素標記CD26抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Dysferlin Dysferlin蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
ADV IgM XI 腺病毒 IgM Ⅺ型(間接法二步法)
MMP-28 英文名稱: 基質(zhì)金屬蛋白酶28抗體 0.2ml
ADM R 英文名稱: 腎上腺髓質(zhì)素受體抗體 0.1ml
Anti-CD26/ADCP2/DPP IV /FITC 熒光素標記CD26抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
PF3(Mouse platelet factor 3) ELISA Kit 小鼠血小板因子3Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-FLASH/CASP8AP2/FITC 熒光素標記半胱蛋白酶8相關(guān)蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ELMO1 吞噬細胞運動蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
OSM (Rabbit Oncostatin-M) ELISA Kit 兔抑瘤素M 96T
MMP-26 英文名稱: 基質(zhì)金屬蛋白酶-26抗體 0.2ml
AXL 英文名稱: 粘附相關(guān)激酶抗體 0.1ml
Anti-FLASH/CASP8AP2/FITC 熒光素標記半胱蛋白酶8相關(guān)蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Ach ELISA Kit 大鼠乙酰Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ACE2/FITC 熒光素標記血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Fibrinogen gamma chain 鏈抗體 規(guī)格 0.2ml
PP(Mouse Protein Phosphatase) ELISA Kit 小鼠蛋酸酶 96T
MMP24 英文名稱: 基質(zhì)金屬蛋白酶-24抗體 0.1ml
APOD 英文名稱: 載脂蛋白D抗體 0.2ml
Anti-ACE2/FITC 熒光素標記血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CXCR3(Mouse CXC-chemokine receptor 3) ELISA KIT 小鼠CXC趨化因子受體3Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CD25/IL-2RA/FITC 熒光素標記CD25/白介素2-受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Dystrophin/DMD 肌營養(yǎng)不良蛋白 規(guī)格 0.1ml
MT/MLT (Rat Melatonin,MT/MLT) ELISA Kit 大鼠褪黑素 96T
MMP-23 英文名稱: 基質(zhì)金屬蛋白酶23抗體 0.2ml
HLE人肝癌細胞Adiponectin 英文名稱: 脂聯(lián)素抗體 0.1ml
Anti-CD25/IL-2RA/FITC 熒光素標記CD25/白介素2-受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
PGE2 ELISA Kit(mouse) 小鼠前列腺素E2Multi-class antibodies規(guī)格: 96T
Anti-CD20/MS4A1/PE 熒光素PE標記CD20抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh E.coli O157:H7 腸出血性大腸桿菌埃希氏菌O157:H7抗體 規(guī)格 0.2ml
IL-1 Alpha ELISA kit 魚類白介素1α 96T
MMP-22 英文名稱: 基質(zhì)金屬蛋白酶22抗體 0.2ml
ADRB2 英文名稱: 能受體β2/β2-AR抗體 0.1ml
Anti-CD20/MS4A1/PE 熒光素PE標記CD20抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng):取6cm細胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細胞長滿之后,提取細胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達效率。
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