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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>其它ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96T分泌成分ELISA試劑盒
白細(xì)胞介素23ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢(shì)如下:
公司產(chǎn)品僅用于科研
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
分泌成分ELISA試劑盒 | secretory component | FS-P65219 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
動(dòng)力蛋白激活蛋白亞3抗體產(chǎn)品別名: 乙酰酮鋅甲苯磺丁脲(標(biāo)準(zhǔn)品)
動(dòng)力蛋白激活蛋白6抗體產(chǎn)品別名: 1,2-二甲-5-羥-3-吲哚甲乙酯甲苯咪唑
脫酶2抗體產(chǎn)品別名: 乙酰酮錳(II)甲苯咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)
磷化DNA依賴性蛋白激酶抗體產(chǎn)品別名: 芐酯甲芬那(標(biāo)準(zhǔn)品)
防御素α4抗體產(chǎn)品別名: 5--2-噻吩叔丁磺酰甲砜霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)
DNA損傷結(jié)合蛋白1抗體產(chǎn)品別名: 泰洛星甲鈷(標(biāo)準(zhǔn)品)
DNA損傷結(jié)合蛋白2抗體產(chǎn)品別名: 異氨鹽鹽甲磺氨地平(標(biāo)準(zhǔn)品)
CD299抗體產(chǎn)品別名: 二乙烯三五乙五鈉甲磺倍他司?。?biāo)準(zhǔn)品)
C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員A抗體產(chǎn)品別名: 9-溴甲丫啶甲磺達(dá)氟沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)
C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族6成員A抗體產(chǎn)品別名: (E)-2-(肟)-N-甲-2-(2-苯氧苯)乙酰甲磺多拉司瓊(標(biāo)準(zhǔn)品)
B淋巴銜接分子DAPP1抗體產(chǎn)品別名: 4-氟-2-甲磺多沙唑(標(biāo)準(zhǔn)品)
DNA酶1樣蛋白1抗體產(chǎn)品別名: 4,5-二氨-1-(2-羥乙)吡唑鹽甲磺酚妥拉明(標(biāo)準(zhǔn)品)
抗菌蛋白DCD抗體產(chǎn)品別名: 氟化鋅四水合物甲磺吉米沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)
肌動(dòng)蛋白解聚因子抗體產(chǎn)品別名: 阿維菌素苯甲鹽甲磺加貝酯(標(biāo)準(zhǔn)品)
甘油二酯酰轉(zhuǎn)移酶2抗體產(chǎn)品別名: 4-乙酰丁乙酯甲磺羅哌卡因(標(biāo)準(zhǔn)品)
分泌成分ELISA試劑盒Human fT3(Free Triiodothyronine) ELISA Kit赤曲霉拉丁屬名: Aspergillus ruber
Human GDF6(Growth Differentiation Factor 6) ELISA Kit臭紅菇注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human GDH/GLDH(Glutamate dehydrogenase) ELISA KitPseudomonas fluorescens PfO-1規(guī)格: 冰袋泡沫盒快遞
Human GDF7(Growth Differentiation Factor 7) ELISA Kit成團(tuán)泛菌拉丁屬名: Pantoea agglomerans
Human fT4(Free Thyroxine) ELISA Kit枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
Human FGα(Fibrinogen Alpha) ELISA Kit放射形根瘤菌用途: 微生物肥料
Human FGL1(Fibrinogen Like Protein 1) ELISA Kit谷氨棒桿菌Ⅲ型拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
Human FGL2(Fibrinogen Like Protein 2) ELISA Kit中慢生華癸根瘤菌用途: 與沙打旺共生固氮
Human FRS2(Fibroblast Growth Factor Receptor SubstRate 2) ELISA Kit庫爾勒海洋桿菌拉丁屬名: Pontibacter korlensis
Human fPSA(Free Prostate Specific Antigen) ELISA Kit香菇用途: 食用、藥用
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