當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>其它ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96T肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子ELISA試劑盒
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子ELISA試劑盒 | Chemokine C-C motif Ligand 18 | FS-P65215 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
雙特異性磷酶2抗體產(chǎn)品別名: 2-溴-6-氟甲苯呱西替柳(標(biāo)準(zhǔn)品)
21號染色體開放閱讀框106抗體產(chǎn)品別名: 3-亞甲環(huán)丁呱西替柳雜質(zhì)A(水楊愈創(chuàng)木酚酯)(標(biāo)準(zhǔn)品)
同源轉(zhuǎn)錄因子DLX5抗體產(chǎn)品別名: 1-Boc-3-羥甲氮雜環(huán)丁烷癸氟奮乃靜(標(biāo)準(zhǔn)品)
DVL3蛋白抗體產(chǎn)品別名: 9-芴酮-1-羧桂美(標(biāo)準(zhǔn)品)
DNA依賴蛋白激酶催化亞抗體產(chǎn)品別名: 異煙果糖二磷鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)
GADD153抗體產(chǎn)品別名: 2-羥喹啉-4-甲哈西奈德(標(biāo)準(zhǔn)品)
中間絲蛋白β-synemin抗體產(chǎn)品別名: 庚烯酯核黃素磷鈉混合物(標(biāo)準(zhǔn)品)
MAP激酶激活死亡域蛋白4C抗體產(chǎn)品別名: 2,2',5,5'-四二苯紅霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)
橋粒糖蛋白4抗體產(chǎn)品別名: 葡乙胡椒乙(標(biāo)準(zhǔn)品)
酶動力蛋白3抗體產(chǎn)品別名: 3-氨巴豆異酯琥珀;丁二(標(biāo)準(zhǔn)品)
δ連環(huán)蛋白/δ連環(huán)素/δ鏈接素(δ-catenin)抗體產(chǎn)品別名: 3,4,5,6-四酞亞琥珀多西拉敏(標(biāo)準(zhǔn)品)
胞漿接頭蛋白Dok6抗體產(chǎn)品別名: (R)-(-)-4--3-羥丁乙酯(含有數(shù)量不等的酐)琥珀甲潑尼龍(標(biāo)準(zhǔn)品)
胞漿接頭蛋白Dok5抗體產(chǎn)品別名: 2,3-二甲-5-乙吡琥珀普卡必利
癌中心體相關(guān)蛋白抗體產(chǎn)品別名: 噻唑-2-甲琥珀舒馬曲普坦(標(biāo)準(zhǔn)品)
DCAF13蛋白抗體產(chǎn)品別名: 2,3-二乙吡琥乙紅霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)
肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子ELISA試劑盒Human GSTα4(Glutathione S Transferase Alpha 4) ELISA Kit鮮綠青霉拉丁屬名: Penicillium viridicatum
Human Hepc(Hepcidin) ELISA Kit釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Human GSK3α(Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha) ELISA Kit米曲霉拉丁屬名: Aspergillus oryzae
Human GSP(Glycosylated Serum Protein) ELISA Kit釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
Human GSTα1(Glutathione S Transferase Alpha 1) ELISA Kit日勾維腸桿菌拉丁屬名: Enterobacter gergoviae
Human GPI(Glucose 6 Phosphate Isomerase) ELISA Kit中國克魯維酵母拉丁屬名: Kluyveromyces sinensis
Human GPR120(G Protein Coupled Receptor 120) ELISA Kit黃色短桿菌拉丁屬名: Brevibacterium flavum
Human GPRC5A(G Protein Coupled Receptor, Family C, Group 5, Member A) ELISA Kit猴頭菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human GPR37(G Protein Coupled Receptor 37) ELISA Kit金黃殼囊孢注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human GR(Glutathione Reductase) ELISA Kit貝雷絲孢酵母拉丁屬名: Trichosporon behrendii Lodder et Kreger-van Rij
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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