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人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;TE671 Subline No.2
貨號 | AXB6284 | 規(guī)格 | 1×106 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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產(chǎn)品名稱 | HCC1569人乳腺癌細(xì)胞 | 貨號 | AXB6284 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | HCC1569 |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時候,這時細(xì)胞生長狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護(hù)劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產(chǎn)品:
AQP-5(Mouse Aquaporin 5) ELISA Kit 小鼠水通道蛋白5Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-CD155/PVR/FITC 熒光素標(biāo)記CD155抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh Donkey Ai-human IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格 0.5ml
HBeAb 乙型肝炎e抗體 96T
p95 NBS1 英文名稱: 細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白P95抗體 0.2ml
Acetoacetyl-CoA syhetase 英文名稱: 脂肪酰家族成員1抗體 0.2ml
Ai-CD155/PVR/FITC 熒光素標(biāo)記CD155抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
U S-GH(Human Ultra Sensitive growth hormone) ELISA Kit 人超敏生長激素Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-Leptin receptor(long) 瘦素受體抗體(長)Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh Klotho Klotho多肽蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
NGF ELISA Kit 大鼠神經(jīng)生長因子 96T
p95 NBS1 英文名稱: DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體 0.2ml
CTAGE5 英文名稱: 皮膚T細(xì)胞淋巴瘤相關(guān)抗原5抗體(腦膜瘤表達(dá)抗原6) 0.2ml
Ai-Leptin receptor(long) 瘦素受體抗體(長)Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
IFN- Alpha(Human Ierferon Alpha) ELISA Kit 人α干擾素Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-Gax 生長終止特異性同源盒基因抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh Mouse Ai-human IgG(3D3)/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體 規(guī)格 0.1ml
Human similar to RIKEN cDNA 4933429F08 gene ELISA Kit 人類似RIKEN cDNA 4933429F08 基因 96T
p90RSK 英文名稱: 絲酸/蘇酸激酶p90RSK蛋白抗體 0.1ml
CD8 英文名稱: CD8/CD8-β抗體 0.1ml
Ai-Gax 生長終止特異性同源盒基因抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
PT(Human Prothrombin0 ELISA Kit 人酶原Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-Phospho-PRAS40 (Thr246) 0酸化蛋白激酶AKT底物1抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus aibody Rh HDL/high density lipoprotein 高密度脂蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
HCC1569人乳腺癌細(xì)胞C3(Mouse Compleme 3) ELISA Kit 小鼠補(bǔ)體蛋白3 96T
p75 NGF Receptor 英文名稱: 神經(jīng)生長因子受體抗體 0.1ml
phospho-C-REL (Ser503) 英文名稱: 0酸化淋巴細(xì)胞衍生C-型凝集素抗體 0.1ml
Ai-Phospho-PRAS40 (Thr246) 0酸化蛋白激酶AKT底物1抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
HMGCS1(Human 3-hydroxy-3-methylglutaryl-Coenzyme A syhase 1) ELISA Kit 人3-羥基-3-甲基戊二酰合酶1Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-MLH1/hMLH 1 錯配修復(fù)蛋白1抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus aibody Rh Insulin Receptor alpha 胰島素受體α抗體 規(guī)格 0.1ml
TNFsR- I ELISA Kit 大鼠壞死因子可溶性受體Ⅰ 96T
P73 protein 英文名稱: P73抑制基因抗體 0.1ml
C21orf66 英文名稱: 21號染色體開放閱讀框66抗體 0.1ml
Ai-MLH1/hMLH 1 錯配修復(fù)蛋白1抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細(xì)胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長滿之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗(yàn)證敲減/過表達(dá)效率。
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