當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TPeptide-YY人多肽YYELISA試劑盒實驗原理
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | Peptide-YY人多肽YYELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Peptide YY Elisa Kit |
貨號 | FS-H63434 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準
Exserohilum turcicum (Pass.) K.J. Leonard & Suggs 大斑凸臍蠕孢(斜面)Exserohilum turcicum (Pass.) K.J. Leonard & Suggs分離基物:玉米葉片斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no進行分析檢測及抗病性鑒定,指導(dǎo)。綜合PDA:20%馬鈴薯汁1L,葡萄糖20g ,KH2PO4 3g, MgSO4.7H2O 1.5g,硫胺素微量,瓊脂 15g,pH 自然,121℃,15min。生長條件:25-28℃,好氧存儲條件:定期移植法 純度:98%
Diaporthe│helianthi Munt.-Cvetk. Mihaljč. & M. Petrov 向日葵莖潰瘍病菌Diaporthe│helianthi Munt.-Cvetk. Mihaljč. & M. Petrov分離基物:木欖斜面培養(yǎng)物模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:97%
Flammulina│velutipes var. velutipes (Curtis) Singer 冬菇Flammulina│velutipes var. velutipes (Curtis) Singer斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:97%
Fomitiporia│punicata Y.C. Dai B.K. Cui & Decock 石榴嗜藍孢孔菌Fomitiporia│punicata Y.C. Dai B.K. Cui & Decock分離基物:子實體斜面培養(yǎng)物模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:97%
Postia│fragilis (Fr.) Jülich 脆泊氏孔菌Postia│fragilis (Fr.) Jülich分離基物:子實體斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:98%
Agaricus│litoralis (Wakef. & A. Pearson) Pil&aacu;t 粗柄蘑菇Agaricus│litoralis (Wakef. & A. Pearson) Pil&aacu;t斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:98%
Clitocybe│infundibuliformis (Schaeff.) Qu&eacu;l. 杯傘Clitocybe│infundibuliformis (Schaeff.) Qu&eacu;l.斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:98%
Clitopilus│prunulus (Scop.) P. Kumm. 斜蓋傘Clitopilus│prunulus (Scop.) P. Kumm.斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:98%
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CK18 角蛋白18抗體鹽地匹福林3-羧基苯磺Human TA (Anti-Teichoic Acid Antibody) ELISA Kit
CK18 角蛋白18抗體(C端)鹽地匹福林前體3,4-二氨基苯甲Human AT (AntiThrombin) ELISA Kit
CK18 角蛋白18抗體鹽貝那普利4-溴對三聯(lián)苯Human LIPH (Lipase H) ELISA Kit
CK14/17/42/10 角蛋白14抗體噴昔洛韋4-溴對三聯(lián)苯Human LTβR (Lymphotoxin Beta Receptor) ELISA Kit
CK15 角蛋白15抗體格列美脲雜質(zhì)1 (4-[2-(3-乙基-4-甲基-2-氧-3-吡咯啉-1-甲酰胺基)乙基]苯磺酰胺甲乙酯)5-氧化吲哚Human IGF-2 (Insulin Like Growth Factor 2) ELISA Kit
CK16 角蛋白16抗體鹽阿扎司瓊5-氧化吲哚Human ATGA/TGAB (Anti-Thyroid-Globulin Antibody) ELISA Kit
CK17 角蛋白17抗體鹽普萘洛爾Tris(6,6,7,7,8,8,8-heptafluoro-2,2-dimethyl-3,5-octanedionate)europium(III) hydrate,Eu(FOD)3Human TPO-Ab (Anti-Thyroid-Peroxidase Antibody) ELISA Kit
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