當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>其它ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96T可溶性彈性蛋白片段ELISA試劑盒
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
可溶性彈性蛋白片段ELISA試劑盒 | Soluble Elastin Fragments | FS-P65518 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
核因子/k因結(jié)合核因子 p52/p100抗體產(chǎn)品別名: 2,6-二溴苯桑黃酮
線粒體復合物NDUFS7蛋白抗體產(chǎn)品別名: 3,4,6-三噠桑寄生(標準品)
尼曼匹克C2前體蛋白抗體產(chǎn)品別名: N-Cbz-D-絲氨桑皮苷C(標準品)
煙酰腺二核苷酶1抗體產(chǎn)品別名: 3-溴-2,4,6-三桑皮苷F
一氧化氮合成酶-1抗體(神經(jīng)型)產(chǎn)品別名: 4-溴-1--2-氟苯桑皮酮A
轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)蛋白NKX6.1抗體產(chǎn)品別名: 檸檬鋰桑皮酮E
造血蛋白1抗體產(chǎn)品別名: 2,4-二喹唑啉桑皮酮H
骨巢蛋白抗體產(chǎn)品別名: 3-乙氧-4-甲氧苯甲桑色素(標準品)
NUP54抗體產(chǎn)品別名: 3-溴-4-酚桑椹(標準品)
親核素β1抗體產(chǎn)品別名: 芐氧乙桑辛素;桑根皮素(標準品)
谷氨受體NMDAζ1抗體產(chǎn)品別名: 二甲二二甲酯桑葉(標準品)
谷氨受體NMDAζ2抗體產(chǎn)品別名: 3,5-二溴鄰氨苯甲甲酯桑枝(標準品)
神經(jīng)元素2抗體產(chǎn)品別名: 2-硝-9,9-二甲芴沙蟾精-3-辛二半酯
抑癌因NDRG3抗體產(chǎn)品別名: 1,6-己二鹽鹽沙棘(標準品)
有絲分裂氧化酶1抗體產(chǎn)品別名: 奧沙拉秦鈉沙棘膏(標準品)
可溶性彈性蛋白片段ELISA試劑盒Human TINAGL1 ELISA Kit耐寒短桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human TINAG ELISA Kit大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli
Human PZP(Pregnancy zone protein) ELISA Kit中間普氏菌拉丁屬名: Prevola intermedia
Human TIP47 ELISA Kit平田頭菇3-1注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human TIMM13 ELISA Kit鐮雄腐霉拉丁屬名: Pythium falciforme
Human TIPIN ELISA Kit米根霉拉丁屬名: Rhizopus oryzae
Human TJAP1 ELISA Kit白地霉拉丁屬名: Geotrichum candidum
Human TIMM17A ELISA Kit黃發(fā)鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces flavotricini
Human THRSP ELISA Kit細枝孢拉丁屬名: Cladosporium tenuissimum
Human SIRT7(NAD-dependent deacetylase sirtuin-7) ELISA Kit耐輻射奇球菌拉丁屬名: Deinococcus radiodurans
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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