ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
胡椒有效期: 2年級(jí)別: 醫(yī)藥級(jí)溶解性: 57mg/mL in EtOH來(lái)源: 黑胡椒

4--1-萘酚有效期: 1年級(jí)別: reagent grade溶解性: 100mg/mL in MeOH別名: 4--α-萘酚

3-氨基-5-巰基-1,2,4-三氮唑 有效期: 2年別名: 三唑英文名稱: 3-Amino-5-mercapto-1,2,4-triazole: 16691-43-3

1,4-雙(5-基-2-噁唑基) POPOP有效期: 2年級(jí)別: Research grade別名: BOPOB；2,2′ -p-Phenylene-bis(5-phenyloxazole), POPOP, 液閃增劑英文名稱: POPOP  (1,4-Bis(5-phenyl-2-oxazolyl)benzene)

2,5-二基惡唑(用于閃爍光譜)有效期: 3年別名:  2,5-二基唑; DPO; PPO; 2,5-二基唑; 英文名稱: 2,5-Diphenyloxazole: 92-71-7

肌酐有效期: 2年溶解性: 500 mg/mlWar別名: 2-氨基-1,5-二氫-1-甲基-4H-咪唑啉-4- 肌氨基酐 縮水肌肉素英文名稱: Creatinine

4-溴-2-有效期: 2年別名: 2--4-溴英文名稱: 4-Bromo-2-fluorobenzaldehyde: 57848-46-1

1-丁基-3-甲基咪唑四硼鹽有效期: 復(fù)檢期1年級(jí)別: CP別名: 四硼 1-丁基-3-甲基咪唑鎓英文名稱: 1-Butyl-3-methylimidazolium trafluorobora
SDH人山梨醇脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理CRLF2  胸腺基質(zhì)淋巴生成素受體抗體脊髓腦共濟(jì)失調(diào)2型蛋白抗體2-(二-叔丁膦)-2'-甲基聯(lián)苯Mouse F-TESTO (Free Testoterone) ELISA Kit

TSP-1/THBS1  凝血酶敏感蛋白1抗體芳香基酯酶H抗體去甲托品鹽鹽Mouse fT4 (Free Thyroxine) ELISA Kit

TTF-1  甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1抗體溴區(qū)結(jié)構(gòu)域相鄰鋅指蛋白1A抗體去甲托品鹽鹽Mouse fT3 (Free Triiodothyronine) ELISA Kit

TTF-2  甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2抗體載脂蛋白1抗體9-苯基-9-芴Mouse FLI1 (Friend Leukemia Virus Integration 1) ELISA Kit  

Tubulin-alpha  微管蛋白抗體突觸融合結(jié)合蛋白6抗體氮化鎵Mouse FUCA (Alpha-L-Fucosidase, Tissue) ELISA Kit

Tubulin- Beta  微管蛋白抗體（免疫組化用抗體）精氨酶1抗體氮化銦(III)Mouse GNb1 (G Protein Beta 1) ELISA Kit

Tubulin- Beta/Tuj-1  微管蛋白抗體（免疫組化用抗體）腺苷激酶結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體2,6-二-4-甲氧基苯甲Mouse Gal-6S (galactose-6-sulphate sulphatase) ELISA Kit

gamma tubulin  微管蛋白-gamma抗體三磷腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白7抗體2,6-二-4-甲氧基苯甲Mouse GLb (Galactosidase, Beta) ELISA Kit  
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)