當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TACP人酸性磷酸酶ELISA試劑盒實驗原理
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | ACP人酸性磷酸酶ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Acid Phosphatase, ACP Elisa Kit |
貨號 | FS-H63874 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
化鉍鉀別名: 化鉍合四化鉀;七合鉍鉀英文名稱: Bismuth potassium iodide: 41944-01-8分子式: BiI3·4KI
磷氫鈣有效期: 3年級別: AR英文名稱: Calcium hydrogen phospha dihydra: 7789-77-7
D-葡萄糖鈣有效期: 2年溶解性: 50 mg/mlWar英文名稱: D-Gluconic acid calcium: 299-28-5
氨茶有效期: 2年溶解性: 100mg/ml in War英文名稱: Aminophylline hydra: 317-34-0
丙倍他索 有效期: 2年英文名稱: Clobetasol propiona: 25122-46-7分子式: C25H32ClFO5
(R)-(-)-2-羥基-4-基丁乙酯別名: (R)-(-)-2-羥基-4-基丁乙酯;Ethyl(R)-(-)-2-Hydroxy-4-Phenylbutyra: 90315-82-5分子式: C12H16O3分子量: 208.25
乙二醇二縮水甘油醚別名: 乙二醇二縮水甘油醚;2,2’-(1,2-乙二基雙氧甲醛)二環(huán)氧乙烷;乙二醇二縮水甘油醚669型;乙二醇縮水甘油醚;乙二醇二縮水甘油醚;乙二醇二環(huán)氧丙基醚;乙二醇二縮水甘油醚(俗稱);Quetol651Ethan;1,2-Bis(Glycidyloxy)Ethane;1,2-英文名稱: 1,2-Bis(2,3-epoxypropoxy)ethane: 2224-15-9分子式: C8H14O4
阿維菌素有效期: 2年溶解性: 25mg/ml CHCl3別名: 阿佛曼菌素;阿佛菌素;白螨凈;殺蟲素;阿靈;辛阿乳油;阿巴美丁英文名稱: Abamectin
ACP人酸性磷酸酶ELISA試劑盒實驗原理14-3-3/RBITC 紅色熒光素羅丹明標記14-3-3抗體IgG磷化鐵蛋白Fe65抗體2,5-二苯甲Mouse ICAM-2 (intercellular adhesion molecule 2) ELISA Kit
5-HT/FITC 熒光素標記5-羥色胺抗體IgG磷化鐵蛋白Fe65抗體2,3-二苯甲Mouse ICAM-3 (intercellular adhesion molecule 3) ELISA Kit
5-HT/RBITC 紅色羅丹明標記5-羥色胺抗體IgG磷化APP淀樣肽前體蛋白抗體2,3-二苯甲Mouse IFN-α (Interferon Alpha) ELISA Kit
5-HTR1A/FITC 熒光素標記5-羥色胺受體1A抗體IgG磷化APP淀樣肽前體蛋白抗體2,3-二苯甲Mouse FOXO1 (Forkhead Box Protein O1) ELISA Kit
5-HTR1B /FITC 熒光素標記5-羥色胺受體1B抗體IgG磷化活化復制因子2抗體2-羥基乙基苯甲基硫Mouse IFI16/p16 (Interferon-inducible Protein 16) ELISA Kit
5-HTR2A/FITC 熒光素標記5-羥色胺受體2A抗體IgG磷化活化復制因子2抗體2-羥基乙基苯甲基硫Mouse IFN-α-Ab (Interferon-α Antibody) ELISA Kit
5-HTR2B/FITC 熒光素標記5-羥色胺受體2B(5-HT/serotonin R2B)抗體IgG磷化周期末期促進復合蛋白APC1抗體2-辛基-4-異噻唑啉-3- (OIT)Mouse UCP-1 (Uncoupling Protein 1, Mitochondrial) ELISA Kit
5-HTR3/FITC 熒光素標記5-羥色胺受體3抗體IgG發(fā)育分化增強因子1抗體2-辛基-4-異噻唑啉-3- (OIT)Mouse FIL1d (Interleukin 1 Delta) ELISA Kit
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