當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TBTA人膀胱腫瘤抗原ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
PCDH1人原鈣黏素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
LTA人淋巴毒素αELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ALDH人乙醛脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
FⅫ人凝血因子ⅫELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | BTA人膀胱腫瘤抗原ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human Bladder tumor antigen, BTA Elisa Kit |
貨號 | FS-H63386 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
Diplodia│mangiferae Koord. 色二孢Diplodia│mangiferae Koord.分離基物:芒果斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no果保鮮研究14生長條件:28存儲條件:定期移植法 純度:99%
Oudemansiella│radicata var. furfuracea (Perk) Pegler et Young 長根奧德蘑鱗柄變種Oudemansiella│radicata var. furfuracea (Perk) Pegler et Young斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no可食用150生長條件:22-25存儲條件:定期移植法 純度:95%
Pleurotus│platypus (Cooke et Massee) Sacc. 粗柄側(cè)耳(俗名:北風(fēng)菌)Pleurotus│platypus (Cooke et Massee) Sacc.斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no食用14生長條件:19-24存儲條件:定期移植法 純度:95%
Penicillium│sp. 青霉Penicillium│sp.分離基物:植物根際斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:28-30存儲條件:定期移植法 純度:98%
Isaria│cicadae Miq. *蟬花1-5Isaria│cicadae Miq.分離基物:子實(shí)體斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:28存儲條件:定期移植法 純度:98%
Cytospora│chrysosperma (Pers.) Fr. 金黃殼囊孢菌Cytospora│chrysosperma (Pers.) Fr.分離基物:山楊樹皮斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:18-25存儲條件:定期移植法 純度:>98.0%(T)
Amanita│chrysoleuca Pegler 黃絮鱗鵝膏菌Amanita│chrysoleuca Pegler分離基物:組織塊斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no14生長條件:25-30存儲條件:定期移植法 純度:>98.0%(T)
Lactarius│piperatus (L.) Pers. 白乳菇Lactarius│piperatus (L.) Pers.分離基物:組織塊斜面培養(yǎng)物模式菌株:no14生長條件:25-30存儲條件:定期移植法 純度:97%
BTA人膀胱腫瘤抗原ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理phospho-Bim(Ser87) 磷化死亡調(diào)解子抗體化膽六鋨Oxytetracycline/BSA 土霉素偶聯(lián)牛血清白蛋白
phospho-Bim(Ser55) 磷化死亡調(diào)解子抗體四乙基氫銨Oxytetracycline/OVA 土霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白
phospho-Bim(Ser69) 磷化死亡調(diào)解子抗體吡四乙基氫銨streptomycin/OVA 鏈霉素偶聯(lián)血藍(lán)蛋白
BIRC5/Survivin variant 凋亡抑制因子5抗體潑尼松龍Bradykinin Fragment 2-9Penicillin G/BSA 青霉素G偶聯(lián)牛血清白蛋白
BK channel BK通道蛋白抗體腎上腺素9-芴Penicillin G/OVA 青霉素G偶聯(lián)雞卵白蛋白
BKCa channels 鈣激活通道蛋白抗體維生素D29-芴streptomycin/BSA 鏈霉素偶聯(lián)牛血清白蛋白
Bmi1/PCGF4 組蛋白相關(guān)Bmi1抗體維生素K1N-(3-Oxododecanoyl)-L-homoserine lactonestreptomycin/OVA 鏈霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白
BLNK B淋巴連接蛋白抗體西咪替丁N-(3-Oxododecanoyl)-L-homoserine lactoneMetronidazole/OVA 甲硝唑偶聯(lián)雞卵白蛋白
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