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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TICD人異檸檬酸脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
PCDH1人原鈣黏素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
LTA人淋巴毒素αELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ALDH人乙醛脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
FⅫ人凝血因子ⅫELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類(lèi)型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱(chēng) | ICD人異檸檬酸脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱(chēng) | Human isocitrate dehydrogenase, ICD Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H63869 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢(xún)服務(wù)!
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿(mǎn)板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)
頭孢噻肟別名: 頭孢氨噻頭孢氨噻肟3-乙酰氧基甲基-7-[2-(2-氨基-4-噻唑基)-2-甲氧亞胺基]-乙酰胺基-3-頭孢-4-羧英文名稱(chēng): Cefotaxime acid: 63527-52-6分子式: C16H17N5O7S2
干酪素鈉有效期: 1年溶解性: 25mg/mL in war別名: 酪蛋白鈉;酪朊鈉英文名稱(chēng): Casein Na salt
偶氮脒類(lèi)引發(fā)劑V50有效期: 2年別名: 2,2-偶氮二(2-甲基丙基咪);2,2'-偶氮二異丁基脒;偶氮二(2氨基丙脒)鹽鹽;偶氮二異丁脒鹽鹽;偶氮脒類(lèi)引發(fā)劑VAZO56英文名稱(chēng): AIBA: 2997-92-4
5'-腺嘌呤核苷有效期: 2年級(jí)別: AR溶解性: 50mg/ml 1 M NH4OH來(lái)源: 合成
膽氧化酶有效期: 6個(gè)月級(jí)別: BR溶解性: pH8.0的Tris-HCl緩沖液溶解來(lái)源: from Alcaligenes sp.
二甲基乙二醇酯別名: 二甲基乙二醇酯;雙甲基乙二醇酯;2-甲基-2--1,2-乙二醇酯;甲基乙二醇酯;乙二醇二(甲基)酯;二(甲基)乙二醇酯;乙二醇HEMA-甲基酯;乙二醇二甲基英文名稱(chēng): Ethylene Dimethacryla: 97-90-5分子式: C10H14O4
糊精別名: 白糊精;玉米糊精英文名稱(chēng): Dextrin: 9004-53-9分子式: C6nH10nO5n
沒(méi)食子丙酯 英文名稱(chēng): Propyl galla: 121-79-9分子式: C10H12O5分子量: 212.2
ICD人異檸檬酸脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 谷草轉(zhuǎn)氨酶抗體2-溴-2',4'-二苯乙Mouse HMGB-1 (High mobility group protein B1) ELISA Kit
Batroxobin Protein 蛇巴曲酶抗體三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員5抗體2-溴-2',4'-二苯乙Mouse hs-CRP (high sensitivity C-Reactive Protein) ELISA Kit
Batroxobin 蛇巴曲酶抗體三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員8抗體2-溴-3',4'-二苯乙Mouse HDAC (Histone Deacetylase) ELISA Kit
單抗 單抗?;o酶A脫氫酶長(zhǎng)鏈抗體4-甲氧基-α-溴代苯乙Mouse histon-H2b ELISA Kit
單抗 單抗?;o酶A脫氫酶中鏈抗體4-甲氧基-α-溴代苯乙Mouse Bcl10 (B-Cell CLL/Lymphoma 10) ELISA Kit
多抗 多抗酰基輔酶A脫氫酶短鏈抗體4-甲氧基-α-溴代苯乙Mouse HABP (Hya]uronate binding protein) ELISA Kit
IL-18R Beta/IL1R7/CD218b 白介素-18受體β鏈抗體過(guò)氧化物酶?;o酶A氧化酶1抗體1,2-苯并異噻唑啉-3-(BIT)Mouse HABP1 (Hyaluronan Binding Protein 1) ELISA Kit
abc031 abc031磷化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體1,2-苯并異噻唑啉-3-(BIT)Mouse HAase (Hyaluronidase) ELISA Kit
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