當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TPF-3人血小板因子3ELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | PF-3人血小板因子3ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human platelet factor 3, PF3 Elisa Kit |
貨號 | FS-H64209 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
AntiPannexin 2 (extracellular) Pannexin 2 (胞外)抗體(0.2 ml)
AntiPannexin 1 Pannexin 1抗體(50 ul)
AntiPannexin 1 Pannexin 1抗體(25 ul)
AntiPannexin 1 Pannexin 1抗體(0.2 ml)
AntiPan Voltage Dependent Anion Channels Antibody Pan Voltage Dependent Anion Channels Antibody抗體(50 ul)
AntiPan Voltage Dependent Anion Channels Antibody Pan Voltage Dependent Anion Channels Antibody抗體(0.2 ml)
AntiPan NaV Pan NaV抗體(50 ul)
AntiPan NaV Pan NaV抗體(50 ul)
AntiPan NaV Pan NaV抗體(25 ul)
AntiPan NaV Pan NaV抗體(0.2 ml)
KLHDC9 KLHDC9蛋白抗體 * 0.2ml Deuterium Chloride
LRRC2 LRRC2蛋白抗體 * 0.2ml Deuterium Chloride
LRRC59 LRRC59蛋白抗體 * 0.2ml Deuterium Chloride
LRRC41 LRRC41蛋白抗體 * 0.2ml Phosphoric AcidD3 (D, 99%)
NIPA 間變性淋巴瘤激酶核相互作用伴侶蛋白抗體 * 0.2ml BenzeneD6
phosphoNIPA(Ser354) 間變性淋巴瘤激酶核相互作用伴侶蛋白抗體 * 0.1ml BenzeneD6
RAB40B RAS癌基因家族蛋白RAB40B抗體 * 0.2ml BenzeneD6
RAB40A RAS癌基因家族蛋白RAB40A抗體 * 0.2ml BenzeneD6
載脂蛋白C1(APOC1)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: APOC1 ELISA Kit
Mouse phosphotylinosital 3 kinase (PI3K) ELISA Kit 肌3激酶(PI3K)酶聯(lián)免疫試劑盒
MouseLeptin,LEPELISAkit 瘦素(LEP)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanfibromodulin,FMODELISAKit纖調(diào)蛋白規(guī)格:48T/96T
/組織高質(zhì)純化高爾基體分離試劑盒10次
ELISAKitMMP-5基質(zhì)金屬蛋白酶5規(guī)格:48T/96T
5脂加氧酶(5-LO/LOX)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔NADPH氧化酶1(NOX1)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rabbit NADPH oxidase 1,NOX1 ELISA kit
凝血酶原片段F1+2(F1+2)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: F1+2 ELISA Kit
RabbitPlasminogen,Plg酶聯(lián)免疫試劑盒纖溶酶原(Plg)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanAtaxiaangiectasiamated,ATM酶聯(lián)免疫試劑盒毛細血管擴張性共濟失調(diào)突變基因(ATM)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanconnectivetissuegrowthfactor,CTGFELISAKit結(jié)締組織生長因子(CTGF)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
PF-3人血小板因子3ELISA試劑盒實驗原理磷化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體3-(4-吡基)-D-氨Porcine MBLR (Mannose Binding Lectin Receptor) ELISA Kit
磷化周期素依賴性激酶2抗體3-(4-吡基)-D-氨Porcine MAT (Matrilysin) ELISA Kit
磷化周期檢測點激酶1抗體D-3-(2-吡基)-氨Porcine MYH1 (Myosin Heavy Chain 1, Skeletal Muscle, Adult) ELISA Kit
磷化P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑抗體BOC-D-3-(4-吡基)-氨Porcine KNG1 (Kininogen 1) ELISA Kit
磷化α-連環(huán)蛋白抗體全丁基磺酰Porcine P-PKC (Phospho Protein Kinase C) ELISA Kit
周期素E2抗體全丁基磺酰Porcine MCT (Mast Cell Tryptase) ELISA Kit
磷化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶CAMK2B/D/G抗體全丁基磺酰Porcine CLS (Cardiolipin Synthase) ELISA Kit
腫瘤易感候選基因3抗體全-1-丁磺Porcine GzmA (Granzyme A) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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