產(chǎn)品屬于：

產(chǎn)品名稱：鴨胚胎成纖維細(xì)胞    

產(chǎn)品英文：Duck embryo

貨號(hào)：FS-01X9754

細(xì)胞培養(yǎng)條件：D/F12+10%FBS+1%p/s+0.005mg/ml胰島素+5ng/mlBfGF+1ug/ml抗壞血酸（維C）+7.5mM L-Gln (推薦：PriMed-iCell-003)   

生長(zhǎng)狀態(tài)：貼壁生長(zhǎng)

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

是否提供細(xì)胞STR鑒定：不提供STR鑒定報(bào)告

保存培養(yǎng)溫度（℃）37

運(yùn)輸溫度（℃）：常溫   
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項(xiàng)：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)ELISA試劑盒英文名稱：human S100 calcium binding protein A8/calgranulin A,S100A8 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人前病毒整合位點(diǎn)1(Pim1)ELISA試劑盒英文名稱：human proviral integration site 1,Pim1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人綠膿桿菌外毒A(PEA)ELISA試劑盒英文名稱：Human Pseudomonas Exotoxin A,PEA ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

人流感病毒A(FLU A)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Influenza viruses A,FLU A ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人單核細(xì)胞增多性李斯特菌O((LLO)ELISA試劑盒 英文名稱：Human listeriolysin O,LLO ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)ELISA試劑盒英文名稱：Human hepatitis B virus X Ag,HBxAg ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人腺相關(guān)病毒(AAV)ELISA試劑盒英文名稱：Human adeno-associated virus,AAV ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)ELISA試劑盒英文名稱：Human hepatitis B virus X interacting protein,HBXIP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人傷寒抗原(St-Ag)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Salmonella typhi antigen,St-Ag ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人類嗜T淋巴細(xì)胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)ELISA試劑盒英文名稱：Human T-lymphotropicvirusⅠ,HTLV-ⅠELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人麻疹病毒(MV)ELISA試劑盒英文名稱：Human morbillivirus,MV ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人流行性腮腺炎(EP)ELISA試劑盒英文名稱：Human epidemic parotitis,EP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人痢疾內(nèi)阿米巴抗原ELISA試劑盒英文名稱：Human Entamoeba histolytica Antigen ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA試劑盒英文名稱：Human Lyme IgG ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA試劑盒英文名稱：Human Campylobacter Jejuni PEB1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人衣原體蛋白樣活性因子(CPAF)ELISA試劑盒 英文名稱：Human chlamydial protease-like activity factor,CPAF ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人脊髓灰質(zhì)炎病毒IgG(PV-IgG)ELISA試劑盒英文名稱：Human Poliomyelitis Virus,PV-IgG ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人剛地弓形蟲(chóng)(T.gondii)ELISA試劑盒英文名稱：Human Toxoplasma Gondii,T.gondii ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
鴨胚胎成纖維細(xì)胞HSD17B1/HSD17  羥類固脫氫17β抗體規(guī)格: 0.1ml

BCNG1/HCN1  腦環(huán)核門控通道蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml

B3  乳腺癌相關(guān)蛋白3抗體規(guī)格: 0.1ml

MRGX1/MRGPRC/SNSR  G蛋白偶聯(lián)受體MRGX1抗體規(guī)格: 0.1ml

TSPY1  睪丸特異定蛋白質(zhì)編碼Y1抗體規(guī)格: 0.1ml

DDCT/DDT  D型多巴色脫羧規(guī)格: 0.2ml

Cyclophilin B  親環(huán)蛋白PPIB抗體規(guī)格: 0.2ml

B2  乳腺癌相關(guān)蛋白2抗體規(guī)格: 0.1ml