當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TIDS人艾杜糖硫酸酯酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | IDS人艾杜糖硫酸酯酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human iduronate sulfatase, IDS Elisa Kit |
貨號 | FS-H63885 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
磷二氫鉀 AR: 7778-77-0胺T別名: N--4-甲磺酰胺鈉鹽;對甲磺酰胺鈉;氨基甲砜鈉;亞明T英文名稱: Chloramine T trihydra: 7080-50-4分子式: C7H7ClNNaO2S·3H2O
5-氨基水楊有效期: 2年溶解性: 50mg/ml 1M Hcl別名: 2-羥基-5-氨基甲;3-羧基-4-羥基;間氨基水楊;馬沙拉嗪英文名稱: 5-AS
瑞格列奈有效期: 2年級別: BR溶解性: 10mg/ml CHcl3來源: 合成
胞磷膽鈉有效期: 3年級別: AR來源: 合成英文名稱: Citicoline sodium
磷二氫鈉二水有效期: 2年級別: AR溶解性: 50 mg/mlWar來源: 合成
二基甲(DMAB)別名: 二甲氨基甲;二;二絡(luò)合物;二甲基胺硼;氫化硼(T-4)二甲基胺;二甲基胺;二甲基胺復(fù)合物英文名稱: Borane dimethylamine complex: 74-94-2分子式: C2H10BN
阿托伐他汀鈣有效期: 2年溶解性: 20mg/mlEthanol英文名稱: Atorvastatin calcium salt trihydra: 134523-03-8 /344423-98-9
IDS人艾杜糖硫酸酯酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理Adducin protein/FITC 熒光素標(biāo)記內(nèi)收蛋白抗體IgG轉(zhuǎn)錄激活蛋白crsp70抗體6-溴-1-己烯Mouse MAO (Monoamine Oxidase) ELISA Kit
Adenosine A2A-R/FITC 熒光素標(biāo)記腺苷A2A受體抗體IgG卵巢、胎盤、前列腺、蛋白22抗體6-溴-1-己烯Mouse MCP-2 (Monocyte Chemotactic Protein 2) ELISA Kit
ADFP/ADRP/adipophilin/FITC 熒光素標(biāo)記脂肪組織分化相關(guān)蛋白抗體IgG錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白33B抗體6-溴-1-己烯Mouse MCP-3 (Monocyte Chemotactic Protein 3) ELISA Kit
DRP3/FITC 熒光素標(biāo)記Dystrobrevin α蛋白抗體IgG載脂蛋白C3抗體2-氨基-4,5-二甲氧基苯Mouse MCP-4 (Monocyte Chemotactic Protein 4) ELISA Kit
ADH/AVP/FITC 熒光素標(biāo)記抗利尿激素/血管升壓素抗體IgG凋亡增強(qiáng)核酶抗體2-氨基-4,5-二甲氧基苯Mouse Smad4 (Mothers Against Decapentaplegic Homolog 4) ELISA Kit
Adipo R1/FITC 熒光素標(biāo)記脂聯(lián)素受體-1蛋白抗體IgG染色體脆弱性相關(guān)基因抗體9,10-二(1-萘基)蒽Mouse MTL (Motilin) ELISA Kit
Adipo R2 /FITC 熒光素標(biāo)記脂聯(lián)素受體-2抗體IgG磷化蛋白激酶B抗體9,10-二(1-萘基)蒽Mouse MUC5AC (Mucin-5 subtype AC) ELISA Kit
Adiponectin/FITC 熒光素標(biāo)記脂聯(lián)素抗體IgG銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)β鏈抗體D-erythro-sphingosine-1-phosphateMouse MUC5B (Mucin-5 Subtype B) ELISA Kit
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