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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>其它ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96T雷帕霉素靶蛋白撫生ELISA試劑盒
白細(xì)胞介素23ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下:
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類(lèi)型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
雷帕霉素靶蛋白撫生ELISA試劑盒 | mammalian target of rapamyein | FS-P65542 |
公司產(chǎn)品僅用于科研ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)
神經(jīng)母瘤蛋白PHOX2B抗體產(chǎn)品別名: 化銣玄參(標(biāo)準(zhǔn)品)
周期蛋白依賴性激酶5激活因子1抗體產(chǎn)品別名: 氟化鈣旋覆花(標(biāo)準(zhǔn)品)
肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合體亞5抗體產(chǎn)品別名: 溴化鍶雪膽素甲(標(biāo)準(zhǔn)品)
浦肯野相關(guān)蛋白1抗體產(chǎn)品別名: 無(wú)水溴化鎂雪膽素乙
凋亡誘導(dǎo)受體PLEKHG5抗體產(chǎn)品別名: 化銫雪上一支蒿(標(biāo)準(zhǔn)品)
蛋白質(zhì)磷酶2A-B55抗體產(chǎn)品別名: 重鉻銨雪上一枝蒿甲素(標(biāo)準(zhǔn)品)
棕櫚酰蛋白水解酶2抗體產(chǎn)品別名: 硝鉻(III) 九水合物血根堿(標(biāo)準(zhǔn)品)
多谷氨酰結(jié)合蛋白1抗體產(chǎn)品別名: 鉻鋰 二水合物血竭(麒麟竭)(標(biāo)準(zhǔn)品)
豬藍(lán)耳病病抗體產(chǎn)品別名: 鋇 一水合物血竭素高鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)
對(duì)氧磷酶3抗體產(chǎn)品別名: 無(wú)水化鎂鴉膽子(標(biāo)準(zhǔn)品)
蛋白質(zhì)精氨亞型2抗體產(chǎn)品別名: 5-溴-2-甲-4-甲吡啶鴉膽子苦(標(biāo)準(zhǔn)品)
磷乙轉(zhuǎn)移酶2抗體產(chǎn)品別名: 3-甲-3-苯縮水甘油乙酯(異構(gòu)體混合物)鴉膽子素D(標(biāo)準(zhǔn)品)
磷脂酰肌結(jié)合網(wǎng)格蛋白組裝蛋白抗體產(chǎn)品別名: 氨鈉鴨腳樹(shù)葉堿(標(biāo)準(zhǔn)品)
絲氨/蘇氨蛋白磷酶1調(diào)節(jié)亞10抗體產(chǎn)品別名: 鴨跖草(標(biāo)準(zhǔn)品)
色素氧化酶裝配因子PET112抗體產(chǎn)品別名: 亞鐵七水合物亞氫鈉穿心蓮內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)
雷帕霉素靶蛋白撫生ELISA試劑盒Human SULT4A1 ELISA Kit莖點(diǎn)霉屬拉丁屬名: Phoma sp.
Human SUMF2 ELISA Kit黃柄雞油菌拉丁屬名: Cantharellus xanthopus
Human SUMF1 ELISA Kit枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
Human TBXAS1(Thromboxane-A synthase) ELISA Kit枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
Human SUCLA2 ELISA Kit丁香直絲鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces lilacinorectus
Human SUCLG2 ELISA Kit交鏈孢菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human SUCLG1 ELISA Kit白金針21注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human ARG1(Arginase-1) ELISA Kit漏斗狀側(cè)耳(鳳尾菇)拉丁屬名: Pleurotus sajor-caju
Human SUMO2/3 ELISA Kit假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas baetica
Human SUN1 ELISA Kit洋蔥伯克霍爾德氏菌拉丁屬名: Burkholderia cepacia
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