當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TRNASE人核糖核酸酶ELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。
引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結果,可提供免費技術咨詢服務!
產品名稱 | RNASE人核糖核酸酶ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Ribonuclease, RNASE Elisa Kit |
貨號 | FS-H63879 |
公司“質量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
L-丁硫氨-亞砜亞胺有效期: 2年溶解性: 50 mg/mlWar別名: 丁硫氨-亞砜亞胺;L-BSO英文名稱: L-Buthionine-sulfoximine
橙花叔醇(順反異構體混和物)有效期: 2年英文名稱: Nerolidol, mixture of cis and trans : 7212-44-4分子式: C15H26O
兔肌動蛋白英文名稱: Actin from rabbit muscle: 51005-14-2儲存條件: 2-8℃純度: 85%
DL-半胱氨鹽鹽無水物別名: DL-2-氨基-3-巰基丙鹽鹽;DL-鹽半胱氨無水物;DL-氫半胱氨無水物英文名稱: DL-Cysine HC1: 10318-18-0分子式: C3H8NO2S
磺胺間甲氧嘧英文名稱: Sulfamonomethoxine: 1220-83-3分子式: C11H12N4O3S分子量: 280.3
黑別名: 黑;醇黑;醇溶黑;醇溶黑;醇溶尼格洛辛;黑色素(醇溶);酒精元;溶劑黑5;IndulinBlack英文名稱: Nigrosine, Alcohol Soluble: 11099-03-9儲存條件: RT
1,3-二甲基硫脲有效期: 2年溶解性: 1 g/mL in war別名: N,N′-二甲基硫脲英文名稱: N,N′-Dimethylthiourea
5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉有效期: 2年級別: BR英文名稱: Sodium 5-nitroguaiacola: 67233-85-6
RNASE人核糖核酸酶ELISA試劑盒實驗原理Rat IgA/FITC 熒光素標記兔抗大鼠IgA抗體腺相關病5 VP1抗體4-甲基-2-甲Mouse Lp-a (Lipoprotein a) ELISA Kit
ABI1/SSH3BP1/FITC 熒光素標記ABI1/SSH3BP1蛋白抗體IgG脂肪脫氫酶抗體4-甲基-2-甲Mouse Lp-PL-A2 (Lipoprotein-associated Phospholipase A2) ELISA Kit
ACD/PTOP/FITC 熒光素標記腎上腺皮質發(fā)育異常蛋白抗體IgG抗利尿激素1A抗體4-甲基-2-甲Mouse PAL (L-Phenylalanine ammonla-lyase) ELISA Kit
ACE1/FITC 熒光素標記血管緊張素轉換酶抗體IgG抗利尿激素受體1B抗體2-氨基-4-甲Mouse LHRH (Luteinizing Hormone-Releasing Hormone) ELISA Kit
ACE2/FITC 熒光素標記血管緊張素轉換酶2抗體IgG二磷腺苷核糖基化因子鳥嘌呤核苷交換因子2抗體2-氨基-4-甲Mouse LFA-3 (lymphocyte function associated antigen 3) ELISA Kit
ACEI/FITC 熒光素標記血管緊張素1轉換酶抑制劑抗體IgGα增強子結合蛋白1抗體4-芐氧基吡-N-氧化物Mouse Lptn/XCL1 (Lymphotactin) ELISA Kit
Acetyl CoA Carboxylase/FITC 熒光素標記兔抗人、大、鼠、猴、牛乙酰輔酶A羧化酶抗體IgG脊髓腦共濟失調10抗體4-芐氧基吡-N-氧化物Mouse LZM (Lysozyme) ELISA Kit
Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、鼠、猴、牛磷化乙酰輔酶A羧化酶抗體IgG蛋白激酶A錨定蛋白7抗體肉桂基Mouse BSP (Bone Sialoprotein) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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