產(chǎn)品屬于：

產(chǎn)品名稱：股動脈平滑肌細(xì)胞    

產(chǎn)品規(guī)格：5×105

貨號：FS-01X9783

產(chǎn)品類型：原代細(xì)胞

單位：T25/瓶

提供細(xì)胞鑒定：提供免疫熒光鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）：37

運輸溫度（℃）：常溫

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

人抗巨細(xì)胞病毒抗體IgG(anti-CMV IgG)ELISA試劑盒 英文名稱：Human anti-cytomegalovirus IgG antibody,anti-CMV IgG ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒英文名稱：Human pregnancy associated plasma protein A,PAPP-A ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人可溶性白細(xì)胞抗原G(sHLA-G)ELISA試劑盒英文名稱：Human soluble human leucocyte antigen G1,sHLA-G ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人補體因子D(CFD)ELISA試劑盒英文名稱：Human complement factor D,CFD ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人血漿纖維連接蛋白(pFN)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Plasma fibronectin,pFN ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人細(xì)胞纖維連接蛋白(cFn)ELISA試劑盒 英文名稱：Human cellular fibronectin,cFn ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人總蛋白S(TPS)ELISA試劑盒英文名稱：Human Total protein S,TPS ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人血清剝奪反應(yīng)相關(guān)蛋白(SDPR)ELISA試劑盒英文名稱：human serum deprivation response,SDPR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人中性粒細(xì)胞防御1-3(HNP1-3)ELISA試劑盒英文名稱：Human neutrophil peptide 1-3,HNP1-3 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人嗜性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒英文名稱：Human eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

人血漿抗凝蛋白S(PS) ELISA試劑盒 英文名稱：Human plasma anticoagulant protein S,PS ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人血漿抗凝蛋白C(PC) ELISA試劑盒 英文名稱：Human plasma anticoagulant protein C,PC ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

G Fc片段(Fcγ)ELISA試劑盒英文名稱：Human Fc region of immunoglobulin G,Fcγ ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)B(CyPB)ELISA試劑盒 英文名稱：Human cyclophilin B,CyPB ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA試劑盒英文名稱：Human coagulation factor ⅩⅢ,FⅩⅢ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒英文名稱：Human coagulation factor Ⅲ,FⅢ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人補體1q(C1q)ELISA試劑盒英文名稱：Human Complement 1q,C1q ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA試劑盒英文名稱：Human platelet membrane glycoprotein Ⅳ,GP-Ⅳ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
股動脈平滑肌細(xì)胞GAS2L1  生長停滯特異性蛋白2家族1抗體規(guī)格: 0.2ml

GAS2L3  生長停滯特異性蛋白2家族3抗體規(guī)格: 0.2ml

GilZ/TilZ  糖皮質(zhì)誘導(dǎo)亮拉鏈蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

MIER2  中胚層誘導(dǎo)早期反應(yīng)蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml

IEX1/Differentiation dependent gene 2 protein  分化相關(guān)基因2蛋白/立即早期反應(yīng)蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

IL-4I1  白細(xì)胞介4誘導(dǎo)蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

JMJD6  凋亡細(xì)胞清除受體抗體規(guī)格: 0.2ml

MAGED1  黑色瘤相關(guān)抗原D1抗體規(guī)格: 0.2ml