當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TACO-2人烏頭酸酶2ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
PCDH1人原鈣黏素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
LTA人淋巴毒素αELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ALDH人乙醛脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
FⅫ人凝血因子ⅫELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | ACO-2人烏頭酸酶2ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human aconitase 2, ACO-2 Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H63911 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
葉醇酯別名: (Z)--3--1-醇酯;順-3-酯;葉醇酯;順式-3-醇酯;順-3-基酯;順式-3-酯;順-3-酯;順-3-基酯,99%;Verdural;(Z)-3-HexenylAceta;Hex-3(Cis)-EnylAceta;Fema3171;LeafAceta;Cis-3-HexEN-1-YLAceta;Cis-3英文名稱: Leaf Aceta: 3681-71-8分子式: C4H6O4Pb
乙酰唑胺有效期: 2年溶解性: 50 mg/ml稀氨水別名: 乙酰唑胺;Acetazolamide英文名稱: Acetazolamide
鄰二甲二乙酯別名: 二甲二乙酯;鄰酞二乙酯英文名稱: DEP: 84-66-2分子式: C12H14O4
二硫代草酰氨別名: 魯必胺;紅氨;二硫代草酰胺;二硫代乙二酰胺;二硫代乙酰胺;魯比胺;乙二硫二胺英文名稱: Dithiooxamide: 79-40-3分子式: C2H4N2S2
2-氨基對二甲英文名稱: 2-Aminorephthalic Acid: 10312-55-7分子式: C8H7NO4分子量: 181.15
對氨基甲有效期: 2年溶解性: 50mg/ml EtOH英文名稱: 4-Aminobenzoic acid: 150-13-0
鹽丫黃素別名: 鹽吖黃;化-3,6-二氨基-10-甲基丫;三勝黃;丫黃素鹽鹽;錐黃英文名稱: Acriflavine hydrochloride: 8063-24-9儲(chǔ)存條件: RT
4,4'-(1-甲基亞乙基)雙(2-甲基酚)別名: 4,4'-(1-甲基亞乙基)雙(2-甲基酚);2,2-雙(4-羥基-3-甲基基)丙烷;4,4'-(1-甲基亞乙基)雙(2-甲基甲醚);α-甲基-4-[(2-氧代甲氧羰基環(huán)戊基)甲基]丙酯;2,2-雙(4-羥基-3-甲基)丙烷;2,2-雙(4-;4,4'-ISOPROPYLIDENEDI-O-CRESOL;4,4'-ISOPROPYLIDENEBIS(2-METHYLPHENOL);4英文名稱: 2,2-Bis(4-hydroxy-3-methylphenyl)propane: 79-97-0分子式: C17H20O2
ACO-2人烏頭酸酶2ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理Aurora A /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、鼠、牛、兔、馬、豬有絲分裂激酶A抗體IgG磷化腎上腺素能受體β2抗體葉縮Mouse PARC (Pulmonary Activation Regulated Chemokine) ELISA Kit
Phospho-Aurora A (p-Thr288) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、鼠磷化有絲分裂激酶A抗體IgG磷化水通道蛋白2抗體乙二Mouse SPA (Pulmonary Surfactant Associated Protein A) ELISA Kit
Aurora B/FITC 熒光素標(biāo)記光激酶B抗體IgG磷化自噬相關(guān)蛋白3抗體羥基乙叉二膦(HEDP)Mouse SPD (Pulmonary Surfactant Associated Protein D) ELISA Kit
Phospho-Aurora B (Thr232)/Aurora C (Thr198) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、鼠磷化有絲分裂激酶B/C抗體IgG縮酶2抗體羥基乙叉二膦(HEDP)Mouse PDHa (Pyruvate Dehydrogenase Alpha) ELISA Kit
Aurora A/Aurora B/Aurora C /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、鼠有絲分裂激酶A、B、C抗體IgG胰腺α淀酶抗體毛殼素Mouse PDK4 (Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) ELISA Kit
Aurora C /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、鼠、牛、兔、豬有絲分裂激酶B抗體IgG錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體噻吩-2-羧乙酯Mouse PDP (Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase) ELISA Kit
AVEN/FITC 熒光素標(biāo)記凋亡、半胱胺蛋白酶激活抑制劑抗體IgG磷化非受體酪氨激酶c-Abl抗體噻吩-2-羧乙酯Mouse PDH E1 (Pyruvate Dehydrogenase-E1) ELISA Kit
AVPR2/FITC 熒光素標(biāo)記精氨加壓素受體2抗體IgG磷化活化復(fù)制因子2抗體L-脯氨叔丁基酯Mouse PK (Pyruvate Kinase, Liver And RBC) ELISA Kit
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