當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>其它ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96T活化凝血因子XELISA試劑盒
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
活化凝血因子XELISA試劑盒 | activated coagulation factor X | FS-P65332 |
公司產(chǎn)品僅用于科研ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
鳥苷環(huán)化酶激活蛋白2抗體產(chǎn)品別名: N-甲四氫-2H-吡喃-4-花生紅衣(標(biāo)準(zhǔn)品)
鳥苷環(huán)化酶激活蛋白3抗體產(chǎn)品別名: 2-溴-3',5'-二氟苯乙酮華北大黃(標(biāo)準(zhǔn)品)
氨酮合成酶抗體產(chǎn)品別名: 4-(2-羥乙氧)苯甲華佩蘭(標(biāo)準(zhǔn)品)
高爾體卷曲螺旋蛋白1抗體產(chǎn)品別名: 3-(4-甲氧苯)-3-氧代甲酯化橘紅(柚)(標(biāo)準(zhǔn)品)
高爾體卷曲螺旋蛋白2抗體產(chǎn)品別名: 3,4,5-三氟苯乙槐定堿(標(biāo)準(zhǔn)品)
戊二酰輔酶A脫氫酶抗體產(chǎn)品別名: 3,4,5-三氟苯乙酮槐耳菌質(zhì)(標(biāo)準(zhǔn)品)
GTP環(huán)反饋調(diào)節(jié)蛋白抗體產(chǎn)品別名: 3,5-二氟芐槐果堿(標(biāo)準(zhǔn)品)
絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCM2抗體產(chǎn)品別名: 3-溴-4-甲氧苯槐花(標(biāo)準(zhǔn)品)
廣泛控制氨合成1樣蛋白1抗體產(chǎn)品別名: 吡咯-2-羧乙酯槐黃
β1-6 N-乙酰氨葡萄糖轉(zhuǎn)移酶2抗體產(chǎn)品別名: (S)-3-甲-1-[2-(1-哌啶)苯]丁.N-乙酰-L-谷氨鹽槐角(標(biāo)準(zhǔn)品)
磷化G蛋白激活內(nèi)向通道1抗體產(chǎn)品別名: 己-3-甲丁酯槐角苷;槐屬苷(標(biāo)準(zhǔn)品)
G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白2抗體產(chǎn)品別名: 2,5-二溴-4-甲咪唑槐米(標(biāo)準(zhǔn)品)
間隙連接蛋白10抗體產(chǎn)品別名: 4--2-甲氧苯甲獾油(標(biāo)準(zhǔn)品)
間隙連結(jié)蛋白46/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體產(chǎn)品別名: N-乙酰-3,5-二-L-酪氨乙酯環(huán)黃芪(標(biāo)準(zhǔn)品)
間隙連結(jié)蛋白50/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體產(chǎn)品別名: 1H-吡唑-1-羧叔丁酯環(huán)杷明;環(huán)巴;去氧芥芬(標(biāo)準(zhǔn)品)
活化凝血因子XELISA試劑盒Human TAP2 (Antigen peptide transporter 2) ELISA KIT大腸埃希氏桿菌拉丁屬名: Escherichia coli
Human TMPPE (Transmembrane protein with metallophosphoesterase domain) ELISA KIT醬油曲霉拉丁屬名: Aspergillus sojae
Human HADHB (Trifunctional enzyme subunit beta, mitochondrial) ELISA KIT枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
Human TRMU (Mitochondrial tRNA-specific 2-thiouridylase 1) ELISA KIT玉蜀黍赤霉拉丁屬名: Fusarium graminearum
Human TRIO (Triple functional domain protein) ELISA KIT毛柄金錢菌(金針菇)注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human SUPT5H (Transcription elongation factor SPT5) ELISA KIT錐形赤褶菇2-3注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
Human DAO(D-amino-acid oxidase) ELISA Kit威氏芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus vedderi
Human TPRA1 (Transmembrane protein adipocyte-associated 1 homolog) ELISA KIT豬丹絲菌拉丁屬名: rhuriopathiae
Human TMPPE (Transmembrane protein with metallophosphoesterase domain) ELISA KIT枯草芽胞桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
Human IGFLR1 (IGF-like family receptor 1) ELISA KIT希爾青霉拉丁屬名: Penicillium shearii
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