細胞株和細胞系的區(qū)別：

細胞培養(yǎng)通風櫥的消毒及布局

保持細胞培養(yǎng)通風櫥內的整潔有序，將所有物品置于直視范圍內。

向放入通風櫥內的所有物品噴灑70%乙醇，擦拭清潔進行消毒。

在通風櫥中部開闊處放置細胞培養(yǎng)容器；移液器置于右前方易于取用；試劑和培養(yǎng)基置于右后方便于吸取；試管架置于中后部；小型容器置于左后部用于盛放廢液。

培養(yǎng)瓶/皿等物品的無菌操作

細胞培養(yǎng)污染物主要分為兩類：

化學污染物,如培養(yǎng)基、血清和水中的雜質、內毒素、增塑劑和去污劑。

生物污染物，如細菌、霉菌、酵母、病毒、支原體以及其他細胞系的交叉污染。

可通過充分了解污染源以及采用良好的無菌技術，降低污染發(fā)生的頻率和嚴重程度。

交叉污染的確認

為細胞換液時，要沿著培養(yǎng)瓶的一側輕輕地加入，而不是直接加到細胞中，以免損傷細胞，當培養(yǎng)的細胞株較為脆弱時尤其需要注意。

使用無菌玻璃吸管或一次性塑料吸管和移液器操作液體時，每支吸管只能使用一次，以免交叉污染。

細胞傳代的時間把握

當細胞呈指數(shù)增殖，貼壁培養(yǎng)的細胞已占據(jù)所有可用基質、沒有擴增空間，或懸浮培養(yǎng)的細胞已超過培養(yǎng)基質所支撐的能力，無法進一步生長時，細胞增殖速度將大大降低甚至停止。為了將細胞密度維持在最佳水平，以便細胞繼續(xù)生長，并且刺激進一步增殖，必須對細胞進行傳代。

細胞培養(yǎng)的步驟：

細胞培養(yǎng)前的準備

細胞變質的征象包括核周出現(xiàn)顆粒、細胞與基質解離以及細胞質空泡形成。

這些變質征象可能為多種原因所致，例如：培養(yǎng)物污染、細胞系衰老或培養(yǎng)基中存在毒性物質，或者這些征象僅表明培養(yǎng)物需要更換培養(yǎng)基。

變質嚴重時將會成為不可逆的變化。

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