當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TBF人B因子ELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | BF人B因子ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human factor B, BF Elisa Kit |
貨號 | FS-H64234 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
PhosphoCDK2 (Thr160) 周期素依賴性激酶2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml 3Keto Fenretinide
PhosphoCDK2 (Thr14) 周期素依賴性激酶2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml 4Epi Minocycline
CDK3 周期素依賴性激酶3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Taurodeoxycholic acid sodium salt
CDK4 周期素依賴性激酶4抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Tetracycline
COB 癌易感基因2相互作用蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ethylhydrocupreine HCl,Optochin HCl
HEC1 癌高表達(dá)蛋白Hec1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Moxidectin
CDK5 周期素依賴性激酶5抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Moxidectin
HURP/DAP5 肝癌上調(diào)蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Amrinone
Lactate Dehydrogenase 5英文簡稱LDH5前列環(huán)素合成酶抗體 檢測范圍:1555nmol/L64U/L
Poliovirus IgA antiobody英文簡稱PVIgA軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗體 檢測范圍:1556nmol/L
mumps virus antibody英文簡稱MVAbT淋巴CD1A抗體 檢測范圍:1557nmol/L
Rhinovirus IgG英文簡稱RhVIgG周期素B1抗體 檢測范圍:1558nmol/L
Rhinovirus IgM英文簡稱RhVIgM胞漿型脂酶A2抗體 檢測范圍:1559nmol/L
laminin β1英文簡稱LAMβ1膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白抗體 檢測范圍:1560nmol/L1000pg/mL
laminin β2英文簡稱LAMβ2緊密連接蛋白6抗體 檢測范圍:1561nmol/L1200pg/mL
laminin β3英文簡稱LAMβ3緊密連接蛋白6抗體 檢測范圍:1562nmol/L800pg/mL
laminin γ2英文簡稱LAMγ2接頭蛋白CrkL抗體 檢測范圍:1563nmol/L2000pg/mL
Adenovirus IgG英文簡稱ADVIgG過氧氫酶抗體 檢測范圍:1564nmol/L1000ng/mL
Influenza viruses IgM英文簡稱FLUIgM色素P450 24A1抗體 檢測范圍:1565nmol/L
respiratory syncytial virus IgG英文簡稱RSVIgG色素P450 2R1抗體 檢測范圍:1566nmol/L
respiratory syncytial virus IgM英文簡稱RSVIgM腫瘤新因子1抗體 檢測范圍:1567nmol/L
Glucosamine6Phosphate Deaminase 2英文簡稱GNPDA2膽固醇25α7羥酶抗體 檢測范圍:1568nmol/L20ng/mL
Fibrinogenlike protein 1英文簡稱FGL1膽固醇24羥酶抗體 檢測范圍:1569nmol/L1500pg/ml
粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: MUC5B ELISA Kit
抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)ELISA檢測試劑盒Humanai-ribosomalPproteinaibody,ARPA/Rib-PELISAKit 96T/48T
白介素7(IL-7)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rat Ierleukin-7,IL-7 ELISA kit
CLIAKitfoGFBeta2ELISAKit轉(zhuǎn)化生長因子β2規(guī)格:48T/96T
全組織色素C氧化酶活性染色試劑盒10次
ELISAKitADH/VP/AVP抗利尿激素/精氨加壓素規(guī)格:48T/96T
25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊孕激素/孕(PROG)酶聯(lián)免疫試劑盒 Goat Progesterone,PROG ELISA Kit
尿微量白蛋白(ALB)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: ALB ELISA Kit
Rabbitsolubleadhesionmolecules,Sam酶聯(lián)免疫試劑盒可溶性粘附分子(Sam)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanbasicfibroblastgrowthfactor4,bFGF-4酶聯(lián)免疫試劑盒性成纖維生長因子4(bFGF-4)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanCreatineKinase,CKELISAKit肌激酶(CK)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
BF人B因子ELISA試劑盒實驗原理4號染色體開放閱讀框32抗體2,6-二苯甲Porcine FLNα (Filamin A, Alpha) ELISA Kit
5號染色體開放閱讀框20抗體2-巰基煙Porcine NT (Neurotensin) ELISA Kit
胱抑素D/半胱氨蛋白酶抑制劑D抗體2-巰基煙Porcine GATA3 (GATA Binding Protein 3) ELISA Kit
胱抑素8/半胱氨蛋白酶抑制劑8抗體2--6-甲氧基-3-硝基吡Porcine PLB (Phospholipase B) ELISA Kit
胱抑素9/半胱氨蛋白酶抑制劑9抗體2--6-甲氧基-3-硝基吡Porcine GHAb (Anti-Growth Hormone Antibody) ELISA Kit
胱抑素S/半胱氨蛋白酶抑制劑S抗體2--6-甲氧基苯Porcine GATA1 (GATA Binding Protein 1) ELISA Kit
煙型乙酰膽受體α3抗體順-5-降冰片烯-endo-2,3-二羧Porcine HPR (Haptoglobin Related Protein) ELISA Kit
3號染色體開放閱讀框33抗體順-5-降冰片烯-endo-2,3-二羧Porcine OXB (Orexin B) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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