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貨號 | AXB10575 | 規(guī)格 | 1×106 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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細胞株和細胞系的區(qū)別:
一、概念不同
1、細胞株:細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的培養(yǎng)物稱為細胞株(Cell Strain)。
2、細胞系:細胞系(cell line)指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。 也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。
二、形成方法不同
1、細胞株:通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的培養(yǎng)物成為細胞株。
2、細胞系:經(jīng)過40-50次分裂的渡過第二次死亡危機,原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功成為細胞系。
三、細胞的延續(xù)性不同
1、細胞株:原代培養(yǎng)的細胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細胞的生長就會出現(xiàn)停滯,大部分細胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去,這些存活的細胞一般能夠傳到40--50代,這種傳代細胞叫做細胞株。
2、細胞系:細胞株的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變。當(dāng)細胞傳至50代以后又會出現(xiàn)“危機",不能再傳下去。但是有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變,并且?guī)в邪┳兊奶攸c,有可能在培養(yǎng)條件下無限制地傳代下去,這種傳代細胞稱為細胞系。
熒光素酶標記的人胚腎細胞;HEK-293-Luc
英文名稱 | HEK-293-Luc | 貨號 | AXB10575 |
生長特性 | 貼壁細胞 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
分類 | 人細胞系 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
細胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥的消毒及布局
保持細胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥內(nèi)的整潔有序,將所有物品置于直視范圍內(nèi)。
向放入通風(fēng)櫥內(nèi)的所有物品噴灑70%乙醇,擦拭清潔進行消毒。
在通風(fēng)櫥中部開闊處放置細胞培養(yǎng)容器;移液器置于右前方易于取用;試劑和培養(yǎng)基置于右后方便于吸取;試管架置于中后部;小型容器置于左后部用于盛放廢液。
培養(yǎng)瓶/皿等物品的無菌操作
細胞培養(yǎng)污染物主要分為兩類:
化學(xué)污染物,如培養(yǎng)基、血清和水中的雜質(zhì)、內(nèi)毒素、增塑劑和去污劑。
生物污染物,如細菌、霉菌、酵母、病毒、支原體以及其他細胞系的交叉污染。
可通過充分了解污染源以及采用良好的無菌技術(shù),降低污染發(fā)生的頻率和嚴重程度。
交叉污染的確認
為細胞換液時,要沿著培養(yǎng)瓶的一側(cè)輕輕地加入,而不是直接加到細胞中,以免損傷細胞,當(dāng)培養(yǎng)的細胞株較為脆弱時尤其需要注意。
使用無菌玻璃吸管或一次性塑料吸管和移液器操作液體時,每支吸管只能使用一次,以免交叉污染。
細胞傳代的時間把握
當(dāng)細胞呈指數(shù)增殖,貼壁培養(yǎng)的細胞已占據(jù)所有可用基質(zhì)、沒有擴增空間,或懸浮培養(yǎng)的細胞已超過培養(yǎng)基質(zhì)所支撐的能力,無法進一步生長時,細胞增殖速度將大大降低甚至停止。為了將細胞密度維持在最佳水平,以便細胞繼續(xù)生長,并且刺激進一步增殖,必須對細胞進行傳代。
細胞培養(yǎng)的步驟:
細胞培養(yǎng)前的準備
細胞變質(zhì)的征象包括核周出現(xiàn)顆粒、細胞與基質(zhì)解離以及細胞質(zhì)空泡形成。
這些變質(zhì)征象可能為多種原因所致,例如:培養(yǎng)物污染、細胞系衰老或培養(yǎng)基中存在毒性物質(zhì),或者這些征象僅表明培養(yǎng)物需要更換培養(yǎng)基。
變質(zhì)嚴重時將會成為不可逆的變化。
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