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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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CK-20人細(xì)胞角蛋白20ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

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產(chǎn)品型號(hào)48T/96T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-05-14 14:34:37瀏覽次數(shù):142次

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CK-20人細(xì)胞角蛋白20ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理產(chǎn)品特點(diǎn):是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法,由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢。

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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等

產(chǎn)品名稱

CK-20人細(xì)胞角蛋白20ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

英文名稱

Human cytokeratin 20, CK-20 Elisa Kit

貨號(hào)

FS-H63371

ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
6)洗板,同(4)。 
7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
9)洗板,同(4)。 
10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
Scleroderma│polyrhizum (J. F. Gmel.) Pers. 多根硬皮馬勃Scleroderma│polyrhizum (J. F. Gmel.) Pers.分離基物:土壤斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no外生菌根菌150生長(zhǎng)條件:25-28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:99%

Isaria│cicadae Miq. #蟬花1-9Isaria│cicadae Miq.分離基物:子實(shí)體斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長(zhǎng)條件:28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:99%

Isaria│cicadae Miq. #蟬花Isaria│cicadae Miq.分離基物:子實(shí)體斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長(zhǎng)條件:28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%

Gliocladium│virens J. H. Mill. Giddens & A. A. Fosr 綠粘帚霉Gliocladium│virens J. H. Mill. Giddens & A. A. Fosr分離基物:根際斜面培養(yǎng)物模式菌株:no14生長(zhǎng)條件:25-28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%

Pestalotiopsis│funerea (Desm.) Syaert 枯斑擬盤多毛孢Pestalotiopsis│funerea (Desm.) Syaert分離基物:針葉斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長(zhǎng)條件:23-30存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%

Haematonectria│haematococca (Berk. & Broome) Samuels & Rossman 腐皮鐮孢菌Haematonectria│haematococca (Berk. & Broome) Samuels & Rossman分離基物:花椒根系斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長(zhǎng)條件:25-28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%

Rhizobium│sp.(Acacia rhizobia) 相思根瘤菌Rhizobium│sp.(Acacia rhizobia)分離基物:根瘤菌斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no63生長(zhǎng)條件:28-30存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%

Agaricus│blazei Murrill 姬松茸Agaricus│blazei Murrill斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長(zhǎng)條件:28-30存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%
CK-20人細(xì)胞角蛋白20ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理phospho-APP/ABPP(Tyr757)  磷化APP(Tyr757)淀樣肽前體蛋白抗體去氫二異丁香酚(R)-(+)-碳烯酯IL-8  白介素8(白介素-8)(抗原)

phospho-APP/ABPP(Thr668)  磷化APP淀樣肽前體蛋白抗體利卡靈-B;利卡靈B3,4,7,8-四甲基-1,10-菲羅啉Insulin Receptor(ISR)  胰島素受體(抗原)

APPL1  APPL1抗體肉豆蔻木脂素3,4,7,8-四甲基-1,10-菲羅啉Integrin Alpha 4/ITGA4(Integrin alpha 4)  整合素-α(抗原)

AQP1  水通道蛋白1抗體澤瀉B-23醋酯[2-[2-(Fmoc-氨基)乙氧基]乙氧基]乙LDL-R(Low-density lipoprotein receptor precursor)  低密度脂蛋白受體(抗原)

AQP2  水通道蛋白-2抗體原花青素B2[2-[2-(Fmoc-氨基)乙氧基]乙氧基]乙Ki-67 peptides  Ki-67 Antigen(多肽抗原)

AQP3  水通道蛋白-3抗體人參皂苷F1(R)-(-)-1-{(S)-2-[Bis(3,5-di-trifluoromethylphenyl)phosphino]ferrocenyl}ethyldi-3,5-xylylphosphine, min. 97%Kiss-1(Metastasis-suppressor KiSS-1 precursor)  腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因(抗原)

AQP4  水通道蛋白-4抗體人參皂苷F23-氨基-4-基吡唑重組K3蛋白  重組K3蛋白

AQP5  水通道蛋白-5抗體人參皂苷CK3-氨基-4-基吡唑Snake poison Protein  蛇蛋白

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