ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
NEGR1 Others Human 人 NEGR1 人裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人肝癌;SMMC-7721

3. 毛發(fā)系統(tǒng)

人結(jié)直腸腺癌;SW480 [SW 480;SW-480] 大鼠腎管狀上皮*培養(yǎng)基 100mL

PC-12(未分化) 大鼠腎上腺嗜鉻瘤(未分化)

鼠神經(jīng)干

BTG2/TIS21  B遷移基因2抗體規(guī)格： 0.1ml

BTK/ATK  蛋白酪氨激酶ATK抗體規(guī)格： 0.2ml

Phospho-Btk(Ser180)  磷化蛋白酪氨激酶ATK抗體規(guī)格： 0.1ml

Phospho-Btk(Tyr223)  磷化蛋白酪氨激酶ATK抗體規(guī)格： 0.1ml

C5a  過(guò)敏素C5a（補(bǔ)體C5a）抗體規(guī)格： 0.2ml

L,5二戊 L鳥單 鳥

L,5二戊 L鳥單 鳥

L,6二已 L賴 L松 L已 賴CC YB11

L,6二已 L賴 L松 L已 賴CC YB11

L,6二已 L賴 L松 L已 賴CC YB11

L,6二已 L賴 L松 L已 賴CC YB11

L,6二已 L賴 L松 L已 賴CC YB11

l458;lantadin分子式：C25H31NO6分子量：441.52

l458;lantadin分子式：C25H31NO6分子量：441.52

LacNAc備注：

LacNAc備注：

Lactalbumin hydrolysate分子式：分子量：

Lactofen分子式：C19H15CLF3NO7分子量：461.77

Lactofen分子式：C19H15CLF3NO7分子量：461.77

LAlanine分子式：C3H7NO2分子量：89.09

LAlanine分子式：C3H7NO2分子量：89.09

LAlanine分子式：C3H7NO2分子量：89.09

LAlanine分子式：C3H7NO2分子量：89.09

LAlanine分子式：C3H7NO2分子量：89.09

LAlanylLalanine分子式：C6H12N2O3分子量：160.17

早老素1(PSEN1)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： PSEN1 ELISA Kit

Mouse lymphocyte chemotactic factor (Lptn/LTN/XCL1) ELISA Kit 淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)酶聯(lián)免疫試劑盒

MouseIerleukin3,IL-3ELISAKIT 白介素3(IL-3)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit胃腸癌標(biāo)志物CA199規(guī)格：48T/96T

/組織mRNA直接純化試劑盒10次

ELISAKitTIMP-4基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4規(guī)格：48T/96T

26S蛋白酶體(26S PSM)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

山羊脂多糖/內(nèi)素(LPS)酶聯(lián)免疫試劑盒 Goat Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit

尿微量白蛋白(MAU/ALB)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： MAU/ALB ELISA Kit

Rabbietinolbindingprotein4,RBP-4酶聯(lián)免疫試劑盒視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T

Humanbactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPI酶聯(lián)免疫試劑盒殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T

HumanC-ReactiveProtein，CRPELISAKitC反應(yīng)蛋白(CRP)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
MHB人高鐵血紅蛋白ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白80抗體3，5-二硫酚Porcine EPHA3 (Ephrin Type A Receptor 3) ELISA Kit

CD163蛋白樣1抗體2--1,3-二苯Porcine PEDF (Pigment Epithelium Derived Factor ) ELISA Kit

周期素依賴性激酶5調(diào)節(jié)蛋白1樣蛋白1抗體二乙乙酯Porcine PCX (Podocalyxin) ELISA Kit

22號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框31抗體二乙乙酯Porcine GAD (Glutamic Acid Decarboxylase) ELISA Kit

分裂周期37樣蛋白1抗體甲中噴布特羅溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)Porcine DHEA-S7 (Dehydroepiandrosterone S7) ELISA Kit

羧肽酶X(M14家族1)抗體PCB 56Porcine PTD (Pentosidine) ELISA Kit

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白135抗體PCB 74Porcine TNNI2 (Troponin I Type 2, Fast Skeletal) ELISA Kit

跨膜結(jié)構(gòu)域邊緣蛋白CEE抗體2--4,6-二苯基-1,3,5-三Porcine P1 (Caspase 1) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)