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貨號 | AXB6336 | 規(guī)格 | 1×106 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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產(chǎn)品名稱 | HT29 gluc C1白種人結(jié)腸腺癌細胞 | 貨號 | AXB6336 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | HT29 gluc C1 |
分類 | 人細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞凍存注意事項:
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候,這時細胞生長狀態(tài)好,細胞數(shù)量也多,并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸,活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產(chǎn)品:
HPRI(Human placeal ribonuclease inhibitor) ELISA Kit 人胎盤核糖核酸抑止劑Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-Polycystin 2 多囊腎蛋白2抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh Hepatitis E Virus ORF3 戊型肝炎病毒抗體 規(guī)格 0.1ml
Gal-6S(Mouse galactose-6-sulphate sulphatase) ELISA Kit 小鼠半乳糖6酯酶 96T
PCTAIRE2 英文名稱: 絲酸/蘇酸蛋白激酶PCTK2抗體 0.2ml
C6orf146 英文名稱: 6號染色體開放閱讀框146抗體 0.2ml
Ai-Polycystin 2 多囊腎蛋白2抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
FLU A(Human Influenza viruses A) ELISA Kit 人流感病毒AMulti-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-IRAK4 白介素-1受體相關(guān)激酶4抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh LHRH/GNRH 黃體激素釋放激素類似物抗體 規(guī)格 0.1ml
EPO(Human Erythropoietin) ELISA Kit 人紅細胞生成素 96T
PCSK4 英文名稱: 原蛋白轉(zhuǎn)化酶4抗體 0.1ml
C11orf57 英文名稱: 11號染色體開放閱讀框57抗體 0.2ml
Ai-IRAK4 白介素-1受體相關(guān)激酶4抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
17-KS(Human 17-ketosteroids) ELISA Kit 人17-酮類固醇Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-phosphoM-CSF Receptor(Tyr546) 0酸化巨噬細胞集落刺激因子受體抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus aibody Rh Jun B 活化蛋白激酶B抗體 規(guī)格 0.1ml
Human colicin ELISA Kit 人大腸菌素 96T
PC 英文名稱: 中心粒周蛋白抗體 0.2ml
C3ORF62 英文名稱: 3號染色體開放閱讀框62抗體 0.2ml
Ai-phosphoM-CSF Receptor(Tyr546) 0酸化巨噬細胞集落刺激因子受體抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
PDH E1(Human pyruvate dehydrogenase-E1) ELISA Kit 人酸脫氫酶E1Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-Phospho-REV-ERB alpha (Ser55/59) 0酸化細胞核受體Rev-Erbα抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus aibody Rh IGF II/IGF2 胰島素樣生長因子-II抗體 規(guī)格 0.1ml
ANA(Human Ai-nuclear Aibody) ELISA Kit 人抗核抗體 96T
HT29 gluc C1白種人結(jié)腸腺癌細胞PCNP 英文名稱: PEST含核蛋白抗體 0.2ml
CNG3 英文名稱: 視錐感光細胞環(huán)0酸鳥苷門控通道蛋白CNG3抗體 0.2ml
Ai-Phospho-REV-ERB alpha (Ser55/59) 0酸化細胞核受體Rev-Erbα抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
ADA(Human adenosine deaminase) ELISA Kit 人腺苷脫氨酶Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-NF-L/68kDa neurofilame 低分子量神經(jīng)絲蛋白抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh IL-17RC/IL-17RL 白介素17受體C抗體 規(guī)格 0.1ml
ATGA/TGAB(Human Ai-Thyroid Microsome Aibody) ELISA KIT 人抗甲狀腺球蛋白抗體 96T
PCNA-Proliferation Marker 英文名稱: 增殖細胞核抗原抗體 0.1ml
CD63 英文名稱: 黑色素瘤相關(guān)抗原抗體 0.1ml
Ai-NF-L/68kDa neurofilame 低分子量神經(jīng)絲蛋白抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng):取6cm細胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細胞長滿之后,提取細胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達效率。
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