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貨號 | AXB6338 | 規(guī)格 | 1×106 cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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產(chǎn)品名稱 | HT55人結(jié)腸癌細胞 | 貨號 | AXB6338 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | HT55 |
分類 | 人細胞系 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細胞凍存注意事項:
(1) 細胞的收獲
用來凍存的細胞一般選擇在細胞約鋪滿 90% 的時候,這時細胞生長狀態(tài)好,細胞數(shù)量也多,并且在收獲細胞前 24 小時換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細胞開始時方法和平時一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細胞再重懸,活細胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細胞保存的最終細胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護劑的使用
細胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細胞特別是雜交瘤細胞在凍存時使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護劑在使用時先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細胞凍存的速率
細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脫水而又不被過度脫水導致細胞損害。對大多數(shù)細胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細胞先在-20℃1-2個小時,再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因為這樣可避免由于有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。
公司正在出售的產(chǎn)品:
TB-Ab IgG(Human tuberculosis aibody IgG) ELISA Kit 人結(jié)核菌桿抗體IgGMulti-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-KLK7 放酶7抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh Laminin Beta 2/Laminin S 層粘連蛋白β2抗體 規(guī)格 0.2ml
ACV-A ELISA Kit 大鼠活化素A 96T
PDCD7 英文名稱: 凋亡相關(guān)蛋白7抗體 0.2ml
CCDC114 英文名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白114抗體 0.2ml
Ai-KLK7 放酶7抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
ACTN-3(Human Alpha-Actinin 3) ELISA Kit 人α-輔肌動蛋白3Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr229) 0酸化核糖體S6蛋白激酶β2抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus aibody Rh HRH4/GPCR105 組織胺H4受體抗體 規(guī)格 0.1ml
MC Ab(Mouse melanocyte aibody) ELISA Kit 小鼠黑色素細胞抗體 96T
PDCD6 英文名稱: 凋亡相關(guān)蛋白6抗體 0.2ml
CA6 英文名稱: 酶6抗體 0.2ml
Ai-Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr229) 0酸化核糖體S6蛋白激酶β2抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
Human similar to RIKEN cDNA 2610307008 gene ELISA Kit 人類似RIKEN cDNA 2610307008 基因Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-Phospho-PAR4 (Thr163) 0酸化蛋白酶活化受體4抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus aibody Rh HOXA9 同源盒蛋白HOXA9抗體 規(guī)格 0.1ml
HSP gp96(Mouse Heat Shock Protein glycoprotein 96)ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白糖蛋白96 96T
PDCD4 英文名稱: 凋亡相關(guān)蛋白4抗體 0.2ml
ccnb1ip1 英文名稱: 周期蛋白B1結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
Ai-Phospho-PAR4 (Thr163) 0酸化蛋白酶活化受體4抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
HT55人結(jié)腸癌細胞HSP-27(Human heat shock protein 27) ELISA Kit 人熱休克蛋白27Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-P73 protein P73抑制基因抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus aibody Rh HSD17B1 羥類固醇脫氫酶17β-HSD抗體 規(guī)格 0.1ml
ATG(Human ai-thymocyte globulin) ELISA Kit 人抗細胞球蛋白 96T
PDCD2L 英文名稱: 程序性細胞死亡2樣抗體 0.2ml
CKAP1 英文名稱: 細胞骨架相關(guān)蛋白1/微管蛋白折疊輔助因子B抗體 0.2ml
Ai-P73 protein P73抑制基因抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.1ml
Tie-2(Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2 ELISA Kit 人血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪激酶2Multi-class aibodies規(guī)格: 48T
Ai-OLFM1 嗅球蛋白1抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus aibody Rh Id1 DNA結(jié)合抑制因子1抗體 規(guī)格 0.2ml
PCNA(Mouse proliferating cell nuclear aigen aibody)ELISA Kit 小鼠抗增殖細胞核抗原抗體 96T
PDCD10 英文名稱: 凋亡相關(guān)蛋白10抗體 0.2ml
CDT2 英文名稱: 維調(diào)節(jié)核基質(zhì)相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
Ai-OLFM1 嗅球蛋白1抗體Multi-class aibodies規(guī)格: 0.2ml
操作步驟:
(1) 細胞系培養(yǎng):取6cm細胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個細胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個孔細胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時,吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細胞長滿之后,提取細胞蛋白或者RNA,驗證敲減/過表達效率。
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