當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TC3a人補體片斷3aELISA試劑盒實驗原理
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | C3a人補體片斷3aELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Complement fragment 3a, C3a Elisa Kit |
貨號 | FS-H64264 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Chicken Myoglobin,MYO/MB ELISA試劑盒 Madecassoside純度:>98%
Chicken NacetylβDglucosaminidase,NAG ELISA試劑盒 Madecassic acid純度:N/A
Chicken nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH ELISA試劑盒 Purpurin純度:
Chicken nitric oxide,NO ELISA試劑盒 pinocembrin純度:>98%
Chicken Nuclear factorkappa B,NFκB ELISA試劑盒Solanesol純度:>98%
Chicken Parathyroid hormone,PTH ELISA試劑盒 Apiin純度:>98%
Chicken Plaet Factor 4,PF4 ELISA試劑盒 Apigenin純度:
LC3B/MAP LC3β/MAP1A 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體 * 0.1ml pTH (334) (bovine)
LC3 α/MAP1A/MAP LC3 Alpha/Beta 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體 * 0.1ml SIGSLAK
LASS1 長壽相關(guān)基因lASS1抗體 * 0.2ml SAMs Peptide
phosphoMAP1LC3A(Ser12) 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體 * 0.1ml Simian Virus 40 Large Tumor Antigen AminoTerminal Peptide
LASS2 腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體 * 0.2ml Somatostatin28
LASS3 長壽相關(guān)基因lASS3抗體 * 0.2ml Substance P (17)
LASS4 長壽相關(guān)基因lASS4抗體 * 0.2ml Substance P (19)
LASS5 長壽相關(guān)基因lASS5抗體 * 0.2ml Substance P (711)
脂蛋脂酶A2(Lp-PLA2)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: Lp-PLA2 ELISA Kit
抗皮膚抗體(ASA)ELISA檢測試劑盒HumanAi-SkinAibody,ASAELISAKit 96T/48T
白抗原DR(HLA-DR)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rat leukocyte aigen-DR,HLA-DR ELISA kit
CLIAKitfoie-2ELISAKit含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨激酶2規(guī)格:48T/96T
全組織衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法(SCHMORL)染色試劑盒10次
ELISAKitEHF抗流行性出血熱病抗體IgG規(guī)格:48T/96T
犬組(HIS)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊免疫球蛋白M(IgM)酶聯(lián)免疫試劑盒 Goat Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit
內(nèi)脂素(visfatin)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: visfatin ELISA Kit
rabbitTissuePolypeptideAigen,TPA酶聯(lián)免疫試劑盒組織多肽抗原(TPA)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanBoneMorphogeneticProtein6,BMP-6酶聯(lián)免疫試劑盒骨形成蛋白6(BMP-6)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanCyclin-D3ELISAKit周期素D3(Cyclin-D3)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
C3a人補體片斷3aELISA試劑盒實驗原理6號染色體開放閱讀框81抗體2--3-硝苯Porcine MLCK/MYLK (Myosin Light Chain Kinase) ELISA Kit
巨噬炎性蛋白1β抗體2--3-硝苯Porcine CFH (Complement Factor H) ELISA Kit
NK抑制性受體2DL4抗體2--3-硝苯Porcine PLD2 (Phospholipase D2) ELISA Kit
NK抑制性受體2DS4抗體薄荷酰胺Porcine PTF1α (Pancreas Specific Tranion Factor 1α) ELISA Kit
NK抑制性受體3DL1抗體薄荷酰胺Porcine AP (Aprotinin) ELISA Kit
7號染色體開放閱讀框46抗體2-代芐硫Porcine GPC1 (Glypican 1) ELISA Kit
蛋白磷酶PP2A癌抑制蛋白抗體2-代芐硫Porcine SEP1 (Selenoprotein 1) ELISA Kit
巨噬甘露糖受體CD206抗體2-代芐硫Porcine AXIN2 (Axis Inhibition Protein 2) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
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