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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第8年

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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TMPF人成熟促進(jìn)因子ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

MPF人成熟促進(jìn)因子ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

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產(chǎn)品型號(hào)48T/96T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-05-14 14:35:48瀏覽次數(shù):116次

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MPF人成熟促進(jìn)因子ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理產(chǎn)品特點(diǎn):是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法,由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢。

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等

產(chǎn)品名稱

MPF人成熟促進(jìn)因子ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

英文名稱

Human maturation promoting factor, MPF Elisa Kit

貨號(hào)

FS-H63376

ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!

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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
6)洗板,同(4)。 
7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
9)洗板,同(4)。 
10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
Macrocybe│crassa (Sacc.) Pegler & Lodge *粗柄白蘑Macrocybe│crassa (Sacc.) Pegler & Lodge分離基物:組織塊斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no屬外生菌根菌14生長條件:25-30存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:97%

Monilinia│fructicola (G. Winr) Honey 美澳型核果褐腐病菌Monilinia│fructicola (G. Winr) Honey分離基物:帶僵果的枝條斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長條件:22-25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:≥95% (HPLC)

Cephalosporium│sp. 頭孢霉屬Cephalosporium│sp.分離基物:旱柳樹皮斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:≥95% (HPLC)

Irpex│lacus (Fr.) Fr. 白齒菌Irpex│lacus (Fr.) Fr.斜面培養(yǎng)物模式菌株:no14生長條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:99%

Aspergillus│niger var. niger Tiegh. 黑曲霉3.3928Aspergillus│niger var. niger Tiegh.分離基物:谷物斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長條件:28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:99%

Saprolegnia│sp. 霉Saprolegnia│sp.分離基物:樣斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長條件:28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%

Auricularia│auricula (Hook. f.) Underw. 黑木耳(AU110)Auricularia│auricula (Hook. f.) Underw.斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:97%

Ganoderma│lucidum (Curtis) P. Karst. 靈芝菌Ganoderma│lucidum (Curtis) P. Karst.分離基物:松栗混交林斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:97%
MPF人成熟促進(jìn)因子ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理AT1R/AGTR1  血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體利血平2-氨基-4-甲氧基-6-甲基-1,3,5-三OAT-1 (Organic anion transporter 1)human  陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1(人源)

ATF1  活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體2--4-胺3-氨基-5-巰基-1,2,4-三氮唑OAT-1 (Organic anion transporter 1)mouse、rat  陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1(大、鼠同源:人源見bs-0606P)

ATF2  活化復(fù)制因子2抗體普噻噸3-氨基-5-巰基-1,2,4-三氮唑OAT-3(Organic anion transporter 3)  陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-3(抗原)

phospho-ATF2(Ser490/498)  磷化活化復(fù)制因子2抗體馬來麥角新3-氨基-5-巰基-1,2,4-三氮唑galectin 9   半乳糖凝集素9(抗原)

phospho-ATF2(Thr69/71)  磷化活化復(fù)制因子2抗體咪唑吲哚-5-羧Oct-4  胚胎干關(guān)鍵蛋白(多肽)

ATF3  活化轉(zhuǎn)錄因子3抗體吡喹吲哚-5-羧OPN(osteopontin)  骨橋蛋白(抗原)

ATG1/ULK1  自噬相關(guān)蛋白1抗體馬來苯那敏吲哚-5-羧P16/CDKN2A (Cyclin-dependent kinase inhibitor-2A)  抑癌基因p16(抗原)

Phospho-ULK1 (Ser467)  磷化自噬相關(guān)蛋白1抗體氫溴東莨菪()順-4-羥基環(huán)己氨特丁酯p21/WAF1/CIP1   p21 核分裂抑制因子之一(抗原)

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