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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TACH小鼠乙酰膽堿ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下:
公司產(chǎn)品僅用于科研
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | ACH小鼠乙酰膽堿ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Mouse acetylcholine, ACH Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-M64395 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
腺苷單磷酸活化蛋白激酶β2抗體英文全稱Kallikrein 11英文簡(jiǎn)稱KLK11檢測(cè)范圍324nmol/L-2000pg/mL
細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體英文全稱Kallikrein 2英文簡(jiǎn)稱KLK2檢測(cè)范圍325nmol/L-8ng/mL
磷酸化蛋白激酶B2抗體英文全稱Kallikrein 6英文簡(jiǎn)稱KLK 6檢測(cè)范圍326nmol/L-8ng/mL
磷酸化鐵蛋白Fe65抗體英文全稱Kininogen英文簡(jiǎn)稱KNG檢測(cè)范圍327nmol/L-16ng/mL
發(fā)育分化增強(qiáng)因子1抗體英文全稱Kininogen 1英文簡(jiǎn)稱KNG1檢測(cè)范圍328nmol/L-8ng/mL
磷酸化發(fā)育分化增強(qiáng)因子1抗體英文全稱colony-stimulating factor英文簡(jiǎn)稱CSF檢測(cè)范圍329nmol/L-800pg/mL
蛋白激酶B3英文全稱Hexokinase II英文簡(jiǎn)稱HK-II檢測(cè)范圍330nmol/L-480mU/L
肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體英文全稱methylmalonic acid英文簡(jiǎn)稱MMA檢測(cè)范圍331nmol/L-1200ng/mL
粘附相關(guān)激酶抗體英文全稱Thyroid stimulating antibody英文簡(jiǎn)稱TSAb檢測(cè)范圍332nmol/L-20ng/mL
磷酸化粘附相關(guān)激酶抗體英文全稱thyroid hormone receptor interactor 6英文簡(jiǎn)稱TRIP6檢測(cè)范圍333nmol/L-640pg/mL
磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體英文全稱Mesothelin英文簡(jiǎn)稱MSLN檢測(cè)范圍334nmol/L-8ng/mL
磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3抗體英文全稱Adipsin英文簡(jiǎn)稱Adipsin檢測(cè)范圍335nmol/L-80ng/mL
凋亡相關(guān)蛋白3抗體英文全稱Keratin, type II cytoskeletal 1b英文簡(jiǎn)稱KRT77檢測(cè)范圍336nmol/L-8ng/mL
自噬相關(guān)蛋白18抗體英文全稱Caveolin-1英文簡(jiǎn)稱Cav-1檢測(cè)范圍337nmol/L-40ng/mL
自噬相關(guān)蛋白4A抗體英文全稱Contactin 1英文簡(jiǎn)稱CNTN1檢測(cè)范圍338nmol/L-16ng/mL
載脂蛋白A4抗體英文全稱anti-tubercle bacilli antobody IgG英文簡(jiǎn)稱TB-Ab IgG檢測(cè)范圍339nmol/L-80ng/mL
無乳鏈球菌(StA)核酸檢測(cè)試劑盒)Ki-67 (D3B5) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)25 ml each
停乳鏈球菌(StD)核酸檢測(cè)試劑盒)Resazurin Cell Viability Kit100 ul
海豚鏈球菌(StI)核酸檢測(cè)試劑盒)Toll-like Receptor 8 (D3Z6J) Rabbit mAb1 Kit
牡蠣皰疹病(OsHV)核酸檢測(cè)試劑盒)PhosphoPlus® β-Catenin (Ser675) Antibody Duet100 ul
錦鯉皰疹病(KHV)核酸檢測(cè)試劑盒)PI3 Kinase p55 (D2B3) Rabbit mAb100 ul
中華鱉虹彩病(STIV)核酸檢測(cè)試劑盒 )PINCH (5G7) Mouse mAb100 ul
嗜水氣單胞菌(AH)核酸檢測(cè)試劑盒)CHD8 (D3C1) Rabbit mAb100 ul
鯉春病(SVCV)核酸檢測(cè)試劑盒)Phospho-HSP27 (Ser82) (D1H2F6) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)100 ul
ACH小鼠乙酰膽堿ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理酪氨蛋白激酶受體A10抗體Deoxymikanolide別名: 分子式: C15H16O5性狀: Powder純度: 97.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
腸道病71型/手足口病病抗體Apocynoside I別名: 分子式: C19H30O8性狀: Powder純度: 96.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
轉(zhuǎn)錄因子ELF1抗體(6R,9R)-3-Oxo-α-ionol glucoside別名: 分子式: C19H30O7性狀: Oil純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
酪氨蛋白激酶B3抗體Dihydromikanolide別名: 分子式: C15H16O6性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
磷化酪氨蛋白激酶受體B1+B2抗體Macarangioside D別名: 分子式: C19H30O8性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
酪氨蛋白激酶受體B1+B2+B3+B4抗體(6R,9S)-3-Oxo-α-ionol glucoside別名: 分子式: C19H30O7性狀: Oil純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
空通氣孔樣蛋白2抗體Grasshopper ketone別名: 分子式: C13H20O3性狀: Powder純度: 96.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
同源盒蛋白轉(zhuǎn)錄因子EN2抗體Cedrol別名: 柏木分子式: C15H26O性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫
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