當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TNPC人鼻咽癌ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
PCDH1人原鈣黏素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
LTA人淋巴毒素αELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ALDH人乙醛脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
FⅫ人凝血因子ⅫELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | NPC人鼻咽癌ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human nasopharyngeal carcinoma, NPC Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H63383 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
Umbelopsis│vinacea (Dixon-Sw.) Arx 葡萄酒色被孢霉Umbelopsis│vinacea (Dixon-Sw.) Arx分離基物:紅豆杉樹皮斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no12生長條件:28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%
Oidiodendron│maius var. maius G.L. Barron 樹孢Oidiodendron│maius var. maius G.L. Barron分離基物:馬尾松根際斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長條件:28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%
Xylaria│sp. 炭角菌Xylaria│sp.分離基物:雪松土壤斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長條件:28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%
Boletus│sp. 牛肝菌6-4Boletus│sp.分離基物:子實(shí)體斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長條件:28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%
Gymnopilus│junonius (Fr.) P.D. Orton 橙鱗傘9Gymnopilus│junonius (Fr.) P.D. Orton分離基物:子實(shí)體斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長條件:28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:97%
Daedalea│dickinsii Yasuda 肉色栓菌Daedalea│dickinsii Yasuda分離基物:子實(shí)體斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長條件:28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:97%
Thelephora│ganbajun M. Zang 干巴菌3Thelephora│ganbajun M. Zang分離基物:子實(shí)體斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長條件:28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:97%
Scleroderma│cepa Pers. 光硬皮馬勃Scleroderma│cepa Pers.分離基物:子實(shí)體斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長條件:28存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%
NPC人鼻咽癌ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理Bcl-2 Bcl-2抗體茶苯海明(+)-2-甲基-L-絲氨WNK4(Ser/Thr-protein kinase WNK4; protein kinase with no lysine 4; protein kinase, lysine –dficient 4) 一種新的絲氨/蘇氨激酶家族成員的基因WNK4(多肽抗原)
Phospho-Bcl-2 (Ser70) 磷化Bcl-2抗體茶3,4-二苯ZNF300 (zinc finger protein ZNF300)- middle 鋅指蛋白300(抗原)
Phospho-Bcl-2 (Thr56) 磷化Bcl-2抗體醋地塞米松3,4-二苯ZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- N-terminal (1a) 鋅指脂蛋白-1a(抗原)
Phospho-Bad(Ser112) 磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體醋3,4-二苯ZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- middle (1b) 鋅指脂蛋白-1b(抗原)
Phospho-Bad(Ser136) 磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體醋潑尼松龍5,10,15,20-四(4-吡基)卟啉ZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- middle (1c) 人鋅指脂蛋白-1c(抗原)
Phospho-Bad(Ser155) 磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體醋曲安奈德5,10,15,20-四(4-吡基)卟啉IFN- Gamma(Interferon Gamma)Ag-mouse、rat 干擾素-γ多肽抗原(大、鼠)
Bcl-6/5 原癌基因Bcl-6抗體達(dá)那唑?qū)妆交倾yIFN- Gamma(Interferon Gamma)Human 干擾素-γ多肽抗原(人)
Bcl-10/CLAP Bcl-10抗體膽石對甲苯磺銀IFN- Beta (Interferon Beta)Anti-mouse,rat 干擾素-β抗原
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