當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>其它ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96T卵泡抑素?fù)嵘鶨LISA試劑盒
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
公司產(chǎn)品僅用于科研
1進(jìn)口抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
卵泡抑素?fù)嵘鶨LISA試劑盒 | Follistatin | FS-P65569 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
平足蛋白抗體(淋巴管內(nèi)皮蛋白)產(chǎn)品別名: 3-甲氧羰-4-氟苯聚己內(nèi)酯;聚ε-己內(nèi)酯(M.W8萬)
蛋白磷酯酶-1B抗體產(chǎn)品別名: (S)-四-2-甲酯封端聚(乳-羥乙75/25)共聚物(重均分子量...
蛋白質(zhì)磷酶-2A抗體產(chǎn)品別名: (R)-(+)-四-2-羧酯封端聚(乳-羥乙75/25)共聚物(重均分子量...
磷酯酶-2Ac抗體產(chǎn)品別名: 2-氨-4-酯封端聚(乳-羥乙75/25)共聚物(重均分子量...
磷化-絲裂原活化蛋白激酶p38抗體(P-p38 MAPK)產(chǎn)品別名: 4-溴芐酯封端聚(乳-羥乙75/25)共聚物(重均分子量...
D型-過氧化酶活化增生受體抗體產(chǎn)品別名: 3-苯酚酯封端聚(乳-羥乙75/25)共聚物(重均分子量...
過氧化酶活化增生受體γ抗體(PPARγ)產(chǎn)品別名: 2-氨-3,5-二吡酯封端聚(乳-羥乙75/25)共聚物(重均分子量...
孕激素受體抗體產(chǎn)品別名: 2-溴-4-苯酯封端聚(乳-羥乙75/25)共聚物(重均分子量...
脯氨羥化酶抗體產(chǎn)品別名: 雷米普利酯封端聚(乳-羥乙75/25)共聚物(重均分子量...
早老素蛋白-1抗體產(chǎn)品別名: 2--6-氟苯乙酮酯封端聚(乳-羥乙75/25)共聚物(重均分子量...
早老素蛋白-1抗體產(chǎn)品別名: 5--1-甲咪唑酯封端聚(乳-羥乙75/25)共聚物(重均分子量...
早老素蛋白-1抗體產(chǎn)品別名: 2-巰咪唑酯封端聚(乳-羥乙75/25)共聚物(重均分子量...
前列腺干抗原抗體產(chǎn)品別名: 2-甲吡咯啉酯封端聚乳羥乙共聚物50/50(重均分子量0.5...
突觸后密度蛋白95抗體產(chǎn)品別名: 水楊異戊酯酯封端外消旋聚乳(重均分子量0.5-1.5萬)
P選擇素抗體產(chǎn)品別名: 5-氟吡啶-3-酯封端外消旋聚乳(重均分子量1.5-3萬)
卵泡抑素?fù)嵘?/font>ELISA試劑盒Human LMTK3(Serine/threonine-protein kinase LMTK3) ELISA Kit白綠色球形孢囊菌拉丁屬名: Sphaerisporangium viridialbum
Human SMCHD1 ELISA Kit豇豆慢生根瘤菌用途: 其中與山螞蝗等豇豆屬植物共生固氮
Human SMARCA4 ELISA Kit梭菌拉丁屬名: septicum
Human SMCR7L ELISA Kit枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
Human SMG5 ELISA Kit節(jié)桿菌拉丁屬名: Arthrobacter sp.
Human SLC5A11 ELISA Kit水稻漢納酵母拉丁屬名: Hannaella oryzae
Human SMARCA5 ELISA Kit需鈉弧菌拉丁屬名: Vibrio natriegens
Human SLN ELISA Kit枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
Human SMARCAL1 ELISA Kit禽腦脊髓炎病拉丁屬名: Avian encephalomyetitis virus
Human SLC5A8 ELISA Kit大靈芝用途: 藥用
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