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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TPF人落葉型天皰瘡抗體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
PCDH1人原鈣黏素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
LTA人淋巴毒素αELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ALDH人乙醛脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
FⅫ人凝血因子ⅫELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類(lèi)型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | PF人落葉型天皰瘡抗體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human Pemphigus Foliaceus, PF Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H63526 |
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)
Armillariella│mellea 密環(huán)菌Armillariella│mellea斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no14生長(zhǎng)條件:25℃ 純度:98%
Thermoanaerobacr│siderophilus 嗜金屬熱厭氧桿菌(00開(kāi)頭的農(nóng)業(yè)均無(wú)法提供)Thermoanaerobacr│siderophilus分離基物:油田采出斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no產(chǎn)甲烷482生長(zhǎng)條件:65℃存儲(chǔ)條件:定期移植法 純度:98%
Paenibacillus│peoriae 皮爾瑞俄類(lèi)芽孢桿菌Paenibacillus│peoriae分離基物:土壤樣品斜面培養(yǎng)物模式菌株:no33生長(zhǎng)條件:20℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98%
Paenibacillus│pabuli 飼料類(lèi)芽胞桿菌Paenibacillus│pabuli分離基物:石油污染土斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no纖維素降解菌2生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:99%
Virgibacillus│picturae 壁畫(huà)枝芽胞桿菌Virgibacillus│picturae分離基物:土壤樣品斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no33生長(zhǎng)條件:20-30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:99%
Rhodococcus│gordoniae 戈氏紅球菌Rhodococcus│gordoniae分離基物:土壤斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no在無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基:中以100mg/L的酚為碳源培養(yǎng),24h內(nèi)對(duì)100mg/L的酚降解率99%2生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:99%
Sphingosinicella│microcystinivorans 食微囊藻素鞘氨醇胞菌Sphingosinicella│microcystinivorans分離基物:土壤斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no在無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基:中添加1%LB情況下,3d對(duì)20pp解率46.5%;對(duì)100ppm和降解率20-25%,降解過(guò)程中有紅色中間代謝產(chǎn)物產(chǎn)生。適生長(zhǎng)溫度為28℃。2生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:≥99%
Myroides│sp. 香味菌Myroides│sp.分離基物:土壤斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no在無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基:中添加100mg/L的N-甲基,降解率達(dá)31%。33生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:98%
PF人落葉型天皰瘡抗體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理GDF-1 生長(zhǎng)、分化因子1抗體滿山紅(興安杜鵑)N,N' -二甲基喹吖Human EPHA3 (Ephrin Type A Receptor 3) ELISA Kit
GDF8/MSTN 生長(zhǎng)分化因子8抗體漏蘆(祁州漏蘆)N,N' -二甲基喹吖Human GAL4 (Galectin 4) ELISA Kit
GDF8 羊抗生長(zhǎng)分化因子8/肌肉抑制素抗體槲寄生(R)-1-[2-(Diphenylphosphino)phenyl]ethylamine, min. 97%Human GAL8 (Galectin 8) ELISA Kit
GDF-9 生長(zhǎng)分化因子9抗體丁香4-氨基-2--5-硝基嘧Human GAL7 (Galectin 7) ELISA Kit
GDNF 膠質(zhì)源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體大棗4-氨基-2--5-硝基嘧Human GAL9 (Galectin 9 ) ELISA Kit
Gelsolin 凝溶膠蛋白抗體女貞子RuCl(p-異苯)[(S,S)-Ts-DPEN]Human Gal-6S (Galactose-6-Sulphatase) ELISA Kit
GFAP 膠質(zhì)纖維性蛋白抗體甘遂RuCl(p-異苯)[(S,S)-Ts-DPEN]Human UBC (Urinary Bladder Cancer Antigen) ELISA Kit
GFP 綠色熒光蛋白(免疫組化用抗體)石榴皮姥鮫烷Human PLA2R1 (Phospholipase A2 Receptor 1) ELISA Kit
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