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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TCT人沙眼衣原體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
IL-2R人白介素2受體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
PCDH1人原鈣黏素ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
LTA人淋巴毒素αELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ALDH人乙醛脫氫酶ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
FⅫ人凝血因子ⅫELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | CT人沙眼衣原體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human Chlamydia trachomatis, CT Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H63528 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
Alicyclobacillus│acidocaldarius 熱脂環(huán)芽胞桿菌Alicyclobacillus│acidocaldarius凍干物安全等級(jí):1437生長條件:60℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:97%
Geobacillus│thermoleovorans 喜熱嗜油地芽胞桿菌Geobacillus│thermoleovorans凍干物安全等級(jí):1266生長條件:60℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:97%
Achromobacr│denitrificans 木糖氧化產(chǎn)菌反硝化亞種Achromobacr│denitrificans凍干物安全等級(jí):12生長條件:26℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:97%
Beijerinckia│indica 印度拜葉林克氏菌Beijerinckia│indica凍干物安全等級(jí):13生長條件:30℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:97%
Xenorhabdus│nematophila 嗜線蟲致病桿菌Xenorhabdus│nematophila凍干物安全等級(jí):12生長條件:26℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:97%
Xanthomonas│campesfris 野油菜黃單胞菌(甘藍(lán)黑腐病黃單胞菌, 野油菜桿菌)Xanthomonas│campesfris凍干物安全等級(jí):11生長條件:27℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:98%
Bacillus│lentus 遲緩芽胞桿菌Bacillus│lentus凍干物安全等級(jí):12生長條件:28-30℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:98%
Bacillus│thuringiensis subsp.pacificus 蘇云金桿菌太平洋亞種Bacillus│thuringiensis subsp.pacificus凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no2生長條件:30℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:98%
CT人沙眼衣原體ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理ID1 DNA結(jié)合抑制因子1抗體鵝不食草三乙二二(對(duì)甲苯磺酯)Human OCLN (Occludin) ELISA Kit
GIG8/ID2 DNA結(jié)合抑制因子2抗體當(dāng)歸尾三乙二二(對(duì)甲苯磺酯)Human SEMA7A (Semaphorin 7A) ELISA Kit
GIP 胃泌素抑制肽抗體南山楂乙酰-d3Human PLVAP (Plasmalemma Vesicle Associated Protein) ELISA Kit
TNFRSF18 糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體抗體補(bǔ)骨脂乙酰-d3Human MN (Metanephrine) ELISA Kit
Glasses Snake poison Protein 兔抗眼鏡蛇蛇蛋白抗體(眼鏡蛇)黨參9-(對(duì)甲苯基)咔唑Human IGF1R3 (Insulin Like Growth Factor 1 Receptor 3) ELISA Kit
GLI1 下游轉(zhuǎn)錄因子Gli1蛋白抗體洋金花9-(對(duì)甲苯基)咔唑Human HAGH (Hydroxyacylglutathione Hydrolase) ELISA Kit
GLP-1 (7-36) 胰高血糖素樣肽-1抗體香附3--4-溴芐Human SPJ (Surfactant Associated Protein J) ELISA Kit
GLP-1 胰高血糖素樣肽-1抗體金銀花3--4-溴芐Human MIgA (Membrane Immumoglobulin A) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
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